REAGENTI DI LABORATORIO: CLASSIFICAZIONE, PREPARAZIONE E FUNZIONI - BIOLOGIA

I reagenti di laboratorio sono sostanze chimiche di varia natura e composizione che aiutano il bioanalista o il medico professionista a condurre una serie di reazioni coinvolte nella determinazione di una varietà di test clinici.

I reagenti possono essere solidi, liquidi o gassosi a seconda del loro stato fisico, e in base alla loro natura chimica possono essere acidi, basi, sali, alcoli, aldeidi, tra gli altri. Tutte le aree di un laboratorio clinico richiedono l'uso di vari reagenti, che differiscono l'uno dall'altro.

Laboratorio di batteriologia con una serie di reagenti. Fonte: foto scattata dall'autore MSc. Marielsa Gil.

I reagenti possono essere acquistati pronti all'uso; alcuni devono essere ricostituiti, altri devono essere preparati dalla miscela di reagenti primari. Possono essere preparati anche con una semplice diluizione.

La funzione di ognuno dipenderà dall'analisi da svolgere. Per questo esistono protocolli specifici che l'analista deve seguire con attenzione.

La manipolazione e la salvaguardia dei reagenti di laboratorio devono seguire gli standard stabiliti dall'ente, per garantire la sicurezza del lavoratore e la loro corretta conservazione. Ecco perché si consiglia di conservare i reagenti secondo la categoria di rischio stabilita dalle normative governative.

Tenere conto dei rischi e mettere in pratica le normative sulla biosicurezza previene gli incidenti sul lavoro.

Fonte: preparato dall'autore MSc. Marielsa gil

Classificazione dei reagenti in base al grado di pericolo

Esistono almeno 5 sistemi che classificano i reagenti in base al loro grado di pericolo. Questi sistemi sono quelli proposti da:

1) La United States Environmental Protection Agency (EPA).

2) Il Dipartimento della sicurezza e salute sul lavoro degli Stati Uniti (OSHA, Occupational Safety and Health Administration).

3) La Comunità Europea (CE).

4) Il codice IMDG (International Maritime Dangerous Goods Code).

5) Le Nazioni Unite (ONU).

In generale e insieme a quanto proposto dall'EPA, possono essere classificati come altamente pericolosi e pericolosi.

-Reagenti altamente pericolosi

Essi sono quelli che possono causare la morte per gli esseri umani in quantità molto basse o che presentano una dose letale nei ratti pari al DL ₅₀ .

-Reagenti pericolosi

Sono sotto-classificati come infiammabili, corrosivi, esplosivi e tossici.

Sostanze infiammabili

Questa categoria include tutti i reagenti che contengono più del 24% di alcol in soluzione o il cui punto di infiammabilità è inferiore a 60 ° C.

Rientrano in questa categoria anche tutti i materiali che possono facilmente provocare incendi per attrito, modificazioni chimiche spontanee o accumulo dei loro gas.

Allo stesso modo, quelli che vengono inceneriti energeticamente a contatto con il fuoco e reagenti ossidanti come clorati, nitrati, manganati e perossidi inorganici.

Sostanze tossiche

I reagenti tossici possono essere suddivisi in irritanti, anestetici, asfissianti, nefrotossici, epatotossici, neurotossici e cancerogeni.

Sostanze corrosive

Gli acidi e le basi forti rientrano in questa categoria, cioè quelli che hanno un pH inferiore a 2,1 e superiore a 12,4. Queste sostanze sono così caustiche che possono corrodere l'acciaio.

Qualsiasi traccia di questi reagenti può reagire con altri residui e formare composti tossici in grado di mettere in pericolo l'integrità dei lavoratori.

Questi reagenti dovrebbero essere lontani dal resto.

Sostanze reattive

Sono reagenti che reagiscono violentemente se combinati con acqua, acidi o basi, generando fumo, vapori o gas. Ecco come reagiscono i reagenti che contengono zolfo o cianuri nella loro composizione.

Sostanze esplosive

Sono sostanze in grado di produrre un'esplosione a 25 ° C ad una pressione di 1,03 kg / cm ² . Questo perché hanno una costante esplosiva uguale o maggiore di quella del dinitrobenzene.

Preparazione dei reagenti

In generale, i reagenti devono essere preparati come segue:

Preparazione del reagente da soluti solidi

Secondo la tecnica, i grammi precisi vengono pesati su una bilancia. I soluti solidi vengono posti in un becher e viene aggiunto un po 'del solvente indicato dalla tecnica, generalmente si usa acqua. Se necessario, la miscela viene riscaldata per favorire la dissoluzione, purché la tecnica lo indichi.

Lasciar raffreddare prima di trasferirlo nel matraccio volumetrico. Usa l'imbuto per il trasferimento. Lavare il becher con un po 'del solvente utilizzato e aggiungerlo alla beuta. Completare fino alla tacca con lo stesso diluente.

Trasferire in una bottiglia pulita e asciutta, etichettare adeguatamente e conservare secondo le specifiche del reagente.

Preparazione di reagenti da soluti liquidi

I millilitri corrispondenti vengono misurati con una pipetta sierologica o volumetrica. Non pipettare direttamente con la bocca. Usa propipette. Fare attenzione che la pipetta non si riempia di bolle.

Per fare ciò, prima di aspirare, assicurarsi che la pipetta sia inserita sul fondo del flacone e che continui a farlo anche dopo che l'aspirazione è terminata.

Porre in un matraccio tarato i millilitri misurati, portare a volume con il diluente. Il pallone può essere tappato e capovolto più volte per mescolare. Trasferisci in un contenitore pulito e asciutto.

Filtrazione di reagenti

Alcuni reagenti richiedono filtrazione, per questo scopo vengono utilizzati imbuti di carta da filtro. Un imbuto liscio viene utilizzato se si desidera recuperare il precipitato o un imbuto pieghettato se il precipitato non è di interesse.

Trasferimento di reagenti solidi

Una spatola pulita e asciutta viene utilizzata per prendere piccole quantità di reagenti solidi. E se la quantità è un po 'più grande, puoi usare una carta piegata a forma di canale per aiutare a far scorrere il reagente nell'altro contenitore.

Trasferimento di reagenti liquidi

Nel trasferimento di liquidi altamente corrosivi, evitare fuoriuscite e schizzi; Per questo viene utilizzato un imbuto e viene posta una bacchetta di vetro attraverso la quale scorrerà il liquido da trasferire.

Se il reagente emette vapori, lavorare sotto una cappa aspirante e utilizzare l'attrezzatura di sicurezza necessaria (guanti, cuffia o maschera, occhiali di sicurezza, camice). Se la cappa aspirante non è disponibile, lavorare in un luogo ben ventilato.

Considerazioni dopo la preparazione dei reagenti

I reagenti dopo la loro preparazione devono essere confezionati in contenitori ermeticamente chiusi, preferibilmente color ambra.

I reagenti appena preparati devono essere accuratamente etichettati con inchiostro indelebile, indicando il nome del reagente, la data di preparazione, la data di scadenza e il tipo di rischio che presenta (per inalazione, ingestione o contatto).

Anche la temperatura di conservazione è importante, il reagente preparato deve essere posto alla corretta temperatura di conservazione. Alcuni possono essere conservati a temperatura ambiente, ma altri richiedono la refrigerazione.

Manipolazione sicura dei reagenti

I reagenti devono essere maneggiati con cura, evitando l'inalazione di vapori, il contatto diretto con la pelle o le mucose e la loro ingestione accidentale. Per fare ciò, devono essere prese misure di biosicurezza, come l'uso di copri bocca, maschere, guanti, occhiali di sicurezza e un camice da laboratorio.

Tutti questi elementi proteggono la persona che manipola i reagenti. Non tutti i reagenti emettono vapori o sono corrosivi, quindi devi imparare a conoscerli.

Prima di maneggiare un reagente, controllare l'etichetta del flacone e osservare i pittogrammi di sicurezza; Questo ti guiderà sulle misure preventive da adottare. Ciò eviterà possibili incidenti.

Schema dei pittogrammi di sicurezza vecchi e attuali. Fonte: Lorenzo.profe

I reagenti classificati come infiammabili non possono essere manipolati vicino a un bruciatore o bruciatore in funzione.

Le etichette dei reagenti devono essere sempre posizionate sul flacone, mai sul tappo. I coperchi dei barattoli non devono essere scambiati, né devono essere posti sul tavolo; devono essere tenuti con le dita durante la manipolazione del reagente.

Non rimettere il reagente in eccesso preso nella bottiglia originale, questo può contaminarlo.

Se il reagente è corrosivo o tossico, non pipettare mai con la bocca, utilizzare sempre una propipetta. Come misura di sicurezza nell'area batteriologica, un pezzo di cotone dovrebbe essere posizionato sulle pipette sopra, in caso di incidenti il cotone funge da barriera.

Quando si vogliono diluire reagenti come acidi forti, ad esempio acido solforico concentrato o acido cloridrico concentrato, si deve tenere conto che l'acqua non verrà mai posta direttamente su di essi, ma il contrario; lentamente l'acido sarà incorporato nell'acqua, maneggiando tutto in una cappa di sicurezza.

Il piano di lavoro deve essere sempre mantenuto pulito e asciutto. In caso di fuoriuscita o incendio, non cercare di risolvere l'incidente con l'acqua.

Conservazione dei reagenti

Le etichette delle bottiglie hanno una striscia colorata che indica a quale gruppo appartiene: striscia rossa infiammabile, bianco corrosivo, giallo reattivo, blu a rischio per la salute, verde a basso rischio, strisce bianche e rosse o bianche e nero incompatibile.

Gli elementi dello stesso gruppo possono generalmente andare insieme e ogni gruppo deve essere separato l'uno dall'altro. Tuttavia, ci sono reagenti che, anche se appartengono allo stesso gruppo, sono incompatibili tra loro; devono essere separati. Controllare l'etichetta per incompatibilità.

Acidi e basi non devono mai essere conservati insieme, allo stesso modo reagenti infiammabili, corrosivi, ossidanti e perossidi dovrebbero essere il più distanti possibile l'uno dall'altro (ripiani separati).

I reagenti corrosivi dovrebbero trovarsi in fondo allo scaffale e quelli più innocui in alto. I barattoli alti vanno in alto sul retro dello scaffale e quelli piccoli in primo piano. I reagenti altamente pericolosi richiedono armadi di sicurezza.

Infine, la scheda MSDS (Material Safety Data Sheets) per ogni reagente deve essere sempre letta prima della manipolazione.

Smaltimento finale dei rifiuti chimici

L'utilizzo di reagenti genera materiali di scarto che devono essere smaltiti in modo tale da influire il meno possibile sull'ambiente.

Reagenti più utilizzati in un laboratorio clinico, composizione e funzione

Fonte: tabella preparata dall'autore MSc. Marielsa gil

Fonte: tabella preparata dall'autrice Marielsa Gil