COS'È LA COLORAZIONE SEMPLICE? CARATTERISTICHE ECCEZIONALI - BIOLOGIA - 2025

La colorazione singola è una procedura di colorazione rapida e semplice in cui viene utilizzato un solo colorante, quindi si chiama semplice. Viene utilizzato principalmente per determinare la morfologia e l'organizzazione delle cellule presenti in un campione.

Le cellule sono naturalmente incolori, quindi è necessario renderle visibili in qualche modo se osservate al microscopio.

Cellule guance umane colorate con semplice colorazione con blu di metilene.

È importante notare che i coloranti utilizzati nella colorazione semplice devono essere basici con una carica positiva (cationica), in modo che possano legarsi spontaneamente alla parete cellulare e al citoplasma.

Queste strutture cellulari sono caricate negativamente. Questo è il motivo per cui il colorante caricato positivamente è attratto dalle cellule e si lega spontaneamente ad esse. Pertanto, tutte le cellule presenti in un campione vengono rapidamente colorate.

Coloranti usati nella colorazione semplice

Esistono diversi coloranti di base che possono essere utilizzati nel laboratorio di microbiologia. I più utilizzati sono:

- Blu di metilene.

- Cristallo viola.

- Verde malachite.

- Fucsina di base.

Tutti questi coloranti funzionano bene nei batteri perché hanno ioni di colore (cationici) caricati positivamente (cromofori).

I tempi di colorazione per la maggior parte di queste macchie sono relativamente brevi. Generalmente variano da 30 secondi a 2 minuti, a seconda dell'affinità del colorante.

È importante tenere presente che prima di colorare un campione mediante semplice colorazione, è necessario allungarlo e fissarlo al vetrino (vetrino); il campione esteso e fisso è chiamato striscio.

I 6 passaggi per una semplice colorazione

Passo 1

Posizionare il vetrino su una griglia e applicare la macchia desiderata. Lascia che il tempo corrispondente agisca.

Normalmente la colorazione semplice richiede da pochi secondi a un paio di minuti, a seconda della macchia utilizzata.

Osservazione

In questa fase è importante non superare il tempo consigliato per il colorante utilizzato, poiché sul foglio potrebbero formarsi dei cristalli, producendo cosiddetti "artefatti" che distorcono la morfologia delle cellule.

Passo 2

Lavare accuratamente lo striscio dal vetrino con acqua distillata da una bottiglia, o anche con acqua di rubinetto che scorre lentamente, fino a quando il deflusso diventa chiaro. Di solito ci vogliono 5-10 secondi.

Osservazione

Non applicare il getto d'acqua direttamente sullo striscio, per evitare che la forza dello stesso danneggi il campione.

Se non disponi di acqua distillata, puoi utilizzare l'acqua del rubinetto senza problemi in quanto non influirà sul risultato della colorazione.

Passaggio 3

Tampona il vetrino con carta assorbente in una direzione e senza strofinare. Assicurati che la parte inferiore del vetrino sia pulita.

Passaggio 4

Osservare lo striscio colorato al microscopio. Inizia con gli obiettivi più distanti per individuare correttamente l'area che desideri osservare in modo più dettagliato. Cambia l'obiettivo per avvicinarti sempre di più al campione.

Osservazione

Per l'uso dell'obiettivo con un ingrandimento maggiore (normalmente 100X), dovrebbe essere usato olio da immersione, poiché questo aiuta la luce a penetrare meglio e l'immagine appare più nitida. Non è necessario utilizzare un vetrino coprioggetto.

Passaggio 5

Infine, smaltire tutti i campioni in un contenitore appropriato etichettato correttamente "rischio biologico".

Riferimenti

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