CIRCUITO BATTERIOLOGICO: CARATTERISTICHE, TIPOLOGIE, USI - BIOLOGIA - 2025

L' ansa batteriologica è uno strumento di lavoro utilizzato dai microbiologi per la semina di colture microbiche (batteri o funghi). È forse lo strumento più utilizzato da questi professionisti.

Il suo utilizzo sembra semplice, ma in realtà richiede molto allenamento. Prima di iniziare la semina, l'ansa deve essere sterilizzata nel becco Bunsen, quindi viene prelevato l'inoculo microbico che può provenire da una coltura liquida o da una coltura solida.

Tipi di cicli batteriologici. Fonte: nessun autore leggibile dalla macchina fornito. ば や お presunto (in base alle rivendicazioni di copyright).

Una volta prelevato l'inoculo, può essere depositato in un mezzo liquido o seminato in un mezzo solido. Dopo ogni procedura il ciclo viene nuovamente sterilizzato. L'impugnatura è adatta anche per realizzare strisci microbici su un vetrino.

L'ansa batteriologica ha molti nomi, tra cui: loop o loop di platino, loop di inoculazione o loop di semi, tuttavia il suo vero nome è loop di Kohle.

Il materiale con cui è realizzato il manico è generalmente una lega di nichel-cromo (nichelcromo) o platino. Un'altra varietà disponibile sul mercato sono gli anelli batteriologici usa e getta in plastica.

D'altra parte, esistono diversi tipi di circuiti batteriologici, ognuno dei quali svolge una funzione all'interno dei compiti svolti da un microbiologo. La scelta della maniglia dipenderà da ciò che deve essere fatto.

Ad esempio, per eseguire uno striato per esaurimento al fine di isolare un microrganismo, viene utilizzato il ciclo di platino, che termina in un anello chiuso, indipendentemente dal fatto che sia calibrato o meno.

Se invece si vuole seminare un campione di urina, dove è importante quantificare le CFU, è necessario utilizzare l'ansa calibrata. Allo stesso modo, per inoculare test biochimici, che richiedono di essere seminati mediante puntura, il cappio dell'ago è essenziale. È importante che la maniglia venga maneggiata da personale addestrato.

caratteristiche

I cicli batteriologici sono costituiti da due estremi. Un'estremità corrisponde alla maniglia o alla base, mentre l'altra è la maniglia stessa.

Base o maniglia della maniglia

La base serve per afferrare la maniglia durante la movimentazione. Di solito è metallico, ma ha un isolante termico per evitare che l'operatore si bruci quando la punta del manico viene sterilizzata sull'accendino. Misura circa 20 cm, anche se può essere più lungo. Ha un filo per regolare la maniglia.

Maniglia

È il fine funzionale, cioè è la parte che entra in contatto con i microrganismi e con i terreni di coltura. Consiste in un filo sottile che viene inserito nella base.

Il manico può essere realizzato in nichelcromo o platino, motivo per cui a volte viene chiamato manico in platino. È lungo circa 6,5 ​​cm e ha uno spessore di circa 0,20 mm. Il manico con il manico può misurare 26,5 cm. Le misure possono variare da produttore a produttore.

tipi

Esistono diversi tipi di loop batteriologici e ognuno ha un uso specifico. I tipi di manici sono i seguenti: manico a forma di anello calibrato, manico a forma di anello non calibrato, manico diritto o ad ago, manico spatolato, manico a forma di "L" e manico a punta affilata.

D'altra parte, le maniglie possono essere permanenti o usa e getta. Quelli per uso permanente sono sterilizzati nell'accendino, essendo riutilizzabili e molto resistenti. Sebbene i prodotti monouso siano sterili in fabbrica, vengono utilizzati solo una volta e vengono scartati.

applicazioni

Manico ad anello, non calibrato

È la maniglia più utilizzata nel laboratorio di microbiologia. Viene utilizzato per effettuare un inoculo di una sospensione microbica (terreno liquido) o di una porzione di colonia (terreno solido), da seminare in un altro terreno di coltura, un test biochimico o un terreno più arricchito o selettivo, a seconda dei casi. È anche utile per creare strisci microbici su un vetrino.

Con questo tipo di ansa, l'inoculo iniziale può essere striato. Inoltre è progettato in modo che scivoli dolcemente sull'agar, senza danneggiarlo. Naturalmente, questo richiede uno staff addestrato per gestire la tecnica di semina, applicando la forza e i movimenti corretti per fare una buona striatura.

Varie tecniche di semina possono essere eseguite con questa maniglia. Esempio, i terreni solidi nelle piastre di Petri sono generalmente seminati dall'esaurimento (esistono diverse tecniche, vedere il video 1).

Questa tecnica ha lo scopo di ottenere colonie isolate al fine di studiarle e identificarle, soprattutto quando il campione è polimicrobico, cioè la coltura non è pura (contiene più di un tipo di microrganismo).

Gli spicchi vengono invece piantati a zig zag per ottenere massa batterica, non essendo necessario in questo caso isolare le colonie.

A volte vengono utilizzati anche per prelevare determinati campioni. Ad esempio, Rojas et al.Usato il ciclo batteriologico per raccogliere campioni di tessuto vaginale raschiato dai ratti.

Ansa batteriologica con punta ad anello, non calibrata. Fonte: Pixinio.com

Manico ad anello, calibrato

Questa maniglia, come suggerisce il nome, è calibrata per assumere una quantità specifica di sospensione microbica. Viene utilizzato quando è necessario che l'inoculo sia conforme a quanto standardizzato nell'art.

Ad esempio, è molto comune per piantare colture di urina. In questo caso, è possibile utilizzare un'ansa calibrata da 0,01 ml e 0,001 ml.

Da notare che le maniglie calibrate hanno un margine di errore, che varia in base all'angolo con cui viene prelevato il campione e alle dimensioni dell'imboccatura del contenitore.

Se l'ansa da 0,001 ml viene inserita verticalmente in un contenitore con una bocca piccola (≤ 7 mm), la quantità prelevata sarà del 50% inferiore a quella desiderata.

Ciò avviene perché minore è il diametro dell'imboccatura del contenitore, maggiore è la tensione superficiale e quindi aumentano le forze di adesione tra (vetro - liquido). Ciò fa sì che la carica di liquido presa dalla maniglia sia inferiore.

Considerando che, se prelevato con un angolo di 45 ° in un contenitore con bocca larga (≥ 22 mm), si può raccogliere il 150% in più della quantità richiesta. In questo caso, la tensione superficiale è minore e le forze di coesione vetro / plastica diminuiscono, mentre aumenta la forza di coesione liquido-liquido.

A causa di quanto sopra, altri metodi per la quantificazione delle unità formanti colonie sono talvolta preferiti per le colture di urina.

Manico dritto o ad ago

È anche chiamato un thread handle. Viene utilizzato per inoculare alcuni test biochimici, in particolare quelli che richiedono di essere seminati con la tecnica della puntura. Esempio, supporti semisolidi preparati sotto forma di un blocco, come: SIM, MIO e supporto O / F.

Inoltre, nel caso di MIO e SIM che valutano la motilità, è essenziale che la puntura venga eseguita con un'ansa ad ago, poiché l'interpretazione di una motilità positiva si ha quando i batteri crescono verso i lati dell'inoculo iniziale.

Un test inoculato con un loop loop può falsare i risultati (falso positivo). Per questo motivo, in questo tipo di semina, bisogna fare attenzione che la puntura sia unica, e che quando viene rimossa fuoriesca nella stessa direzione in cui è entrata.

Un altro test che deve essere seminato con l'ago anche se è preparato a forma di cuneo è il Kligler. In questo test, non è consigliabile che l'ossigeno penetri in profondità nell'agar, poiché è necessario un terreno povero di ossigeno affinché si verifichino determinate reazioni chimiche. Questa maniglia viene anche utilizzata per toccare una colonia specifica ai fini della subcoltura.

Manico spatolato

La maggior parte dei microrganismi dà colonie morbide e facili da eliminare. Tuttavia, esistono alcuni agenti microbici le cui colonie sono dure e secche, ad esempio i micobatteri in generale e alcuni funghi. In questi casi è utile utilizzare il manico spatolato.

Manico a "L"

Il suo uso più frequente è quello di campionare colture fungine, in particolare muffe.

Impugnatura a punta affilata

È utile per prelevare colonie molto piccole presenti nelle colture polimicrobiche, in modo da poterle subcolturare.

Tecniche di semina

Video 1

Sterilizzazione del manico in platino

Il manico deve essere sterilizzato prima e dopo l'uso. Per sterilizzare l'ansa batteriologica nell'accendino, procedere come segue: il manico va posto nella parte superiore della fiamma, assumendo una posizione il più verticale possibile, in modo da sterilizzare dalla punta verso l'alto.

Quando il sottile filamento diventa rosso brillante, si può dire che è sterile. Per usarlo, si raffredda e si preleva il campione scelto. (Vedi video 2).

Sterilizzazione del ciclo batteriologico

Video 2

Riferimenti

1. "Ciclo batteriologico" Wikipedia, The Free Encyclopedia. 23 luglio 2019, 13:31 UTC. 18 agosto 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Manici in metallo calibrati per microbiologi: un'alternativa di produzione nazionale. Soc. Vieni. Microbiol. 2010; 30 (1): 37-42. Disponibile su: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Microbiological Diagnosis. 12 ed. Editoriale Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosi microbiologica. 5a ed. Editoriale Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, et al. Determinazione dell'effetto analgesico dell'estratto di esano dai fiori di Eupatorium arsenei in un modello di dolore acuto nei ratti. mex. scienza. azienda agricola. 2015; 46 (1): 64-69. Disponibile su: scielo.org