ANTISTREPTOLISINA O: QUANTIFICAZIONE, RAZIONALE, TECNICA, PATOLOGIE - BIOLOGIA - 2025

L' O ASO è un anticorpo generato in risposta a un'infezione causata da Streptococcus pyogenes, noto anche come Streptococcus beta-emolitico A. Questo gruppo produce due esotossine con attività emolitica chiamate streptolisine "S" e "O" .

La streptolisina S è responsabile della beta emolisi che si verifica nell'agar sangue e, sebbene sia tossica per alcune cellule del sistema immunitario, non è antigenica. Mentre la streptolisina O, essendo labile contro l'ossigeno, è responsabile dell'emolisi che si verifica sotto l'agar sangue e questo è antigenico.

Streptococcus pyogenes / Diagramma di ciò che accade nel test ASTO (reazione di agglutinazione). (Anticorpi legati alle particelle di lattice che contengono l'antigene specifico). Fonte: Utente: Graham Beards / Alejandro Porto

Pertanto, quando le cellule del sistema immunitario interagiscono con la streptolisina O, si produce una specifica risposta immunitaria, che genera l'attivazione dei linfociti B. Queste cellule producono anticorpi diretti contro la streptolisina O. Pertanto, gli anticorpi sono chiamati antistreptolisina O.

Lo Streptococcus pyogenes produce varie patologie, tra cui: tonsillite, erisipela, impetigine, febbre puerperale, scarlattina e setticemia. Gli anticorpi anti-streptolisina O compaiono da 8 a 30 giorni dopo l'inizio dell'infezione.

La maggior parte di queste infezioni sono molto comuni nella popolazione, quindi è comune che le persone abbiano anticorpi anti-antistreptolisina O nel sangue. Titoli bassi indicano un'infezione passata con questo batterio, ma un titolo alto o in aumento indica un'infezione recente o in corso.

Quantificazione degli anticorpi antistreptolisina O.

In laboratorio, il titolo anticorpale anti-streptolisina "O" può essere misurato mediante un test sierologico. Il test dell'antistreptolisina O (ASTO) si basa su una reazione di agglutinazione con il lattice.

Può essere fatto in modo semiquantitativo, la refertazione in croci o il titolo può anche essere quantificato. È normale e non significativo trovare valori fino a 200 UI / ml o unità Todd / ml. Al di sopra di questo valore è considerato positivo e clinicamente significativo.

Questo test non richiede che il paziente sia a digiuno. Il siero viene utilizzato come campione, ovvero il sangue del paziente viene prelevato e posto in una provetta senza anticoagulante, quindi centrifugato per ottenere il siero.

Base della tecnica ASTO

La tecnica utilizza particelle di lattice come supporto per fissare l'antigene della streptolisina O. Le particelle di antigene assorbite reagiscono con il siero del paziente. Se il paziente ha anticorpi antistreptolisina O, questi si legheranno all'antigene attaccato alla particella di lattice.

Questo legame provoca un'agglutinazione che è macroscopicamente visibile. L'intensità della reazione è direttamente proporzionale alla concentrazione di anticorpi presenti.

tecniche

- Tecnica semiquantitativa

L'intensità della reazione può essere semi-quantificata in croci. Per fare ciò, viene presa e posizionata una piastra di reazione sierologica:

50 µl di siero e 50 µl di reagente ASTO. Mescolate bene con uno stuzzicadenti di legno e mettete in una planetaria per 2 minuti. Osservare. Se un rotatore automatico non è disponibile, deve essere fatto manualmente.

Interpretazione

Sospensione senza grumi (uniforme): negativa

1. + = reazione debole

2. ++ = leggera reazione

3. +++ = reazione moderata

4. ++++ = reazione forte

Si possono quantificare i sieri positivi con 3 e 4 incroci.

- Tecnica quantitativa

Per la quantificazione del titolo si effettuano diluizioni seriali 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

Per fare ciò, procedere come segue: si prendono 4 provette o provette Kahn e su tutte si posizionano 0,5 ml di soluzione fisiologica. Quindi 0,5 ml di siero del paziente vengono aggiunti alla prima provetta. Si mescola bene. Quella provetta corrisponde alla diluizione 1: 2.

Successivamente 0,5 ml vengono trasferiti nella provetta 2 e mescolati bene. Questa provetta corrisponde alla diluizione 1: 4 e così via, fino a raggiungere la diluizione desiderata.

Prendere 50 µl di ciascuna diluizione e reagire con 50 µl di reagente ASTO su una piastra di agglutinazione, come spiegato nella tecnica semiquantitativa.

Interpretazione

Viene presa in considerazione la diluizione massima in cui si osserva un'agglutinazione visibile. I calcoli vengono eseguiti come segue:

ASTO = Inversa della diluizione positiva più alta x la sensibilità della tecnica (costante).

Esempio: paziente con reazione positiva fino a 1: 8

ASTO = 8 x 200 UI / ml = 1600 UI / ml o unità Todd / ml.

Valore di riferimento

Adulto normale: fino a 200 UI / ml

Bambini normali: fino a 400 UI / ml

raccomandazioni

Si consiglia di montare un controllo positivo e uno negativo con i pazienti per garantire che il reagente sia in condizioni ottimali. Se il controllo positivo non agglutina o il controllo negativo si agglutina, il reagente non può essere utilizzato.

La reazione deve essere interpretata dopo 2 minuti, trascorso questo tempo non è valida se c'è agglutinazione. Questi sono falsi positivi.

I sieri iperlipemici interferiscono con la reazione. Possono dare falsi positivi.

Un valore ASTO isolato non è molto utile. Deve essere accompagnato dai sintomi.

Inoltre, si consiglia di eseguire almeno 2 misurazioni ASTO quando si sospetta febbre reumatica o glomerulonefrite post-streptococcica, al fine di dimostrare l'aumento dei livelli di antistreptolisina O e quindi confermare la diagnosi.

Patologie con titoli elevati di antistreptolisina O.

Gli anticorpi anti-streptolisina sono aumentati dopo aver sofferto di un'infezione da Streptococcus pyogenes o da streptococco ß-emolitico di gruppo A.

Tra questi ci sono: faringite acuta, scarlattina, impetigine, erisipela, febbre puerperale e setticemia.

Alcuni pazienti che hanno sofferto di infezioni streptococciche recenti o ricorrenti possono sviluppare malattie autoimmuni come sequela o complicanza dell'infezione post-streptococcica, come glomerulonefrite acuta e febbre reumatica.

Malattie autoimmuni post streptococciche

Febbre reumatica

È una complicanza o sequela infiammatoria che può comparire da 1 a 5 settimane dopo aver contratto un'infezione da streptococco. I titoli di antistreptolisina O aumentano significativamente da 4 a 5 settimane dopo l'insorgenza della malattia.

Un titolo ASTO elevato guida la diagnosi, ma non è correlato alla gravità della malattia e la sua diminuzione non implica un miglioramento.

Gli anticorpi antistreptolisina O reagiscono in modo crociato contro il collagene e le fibre muscolari, interessando alcuni organi (cuore, pelle, articolazioni e sistema nervoso, tra gli altri).

Questa complicanza o sequela si verifica con coinvolgimento cardiaco, febbre, malessere, poliartrite migratoria non suppurativa, corea, ecc.

Glomerulonefrite acuta

La glomerulonefrite acuta è una sequela non suppurativa causata dalla deposizione di complessi antigene-anticorpo sulla membrana basale glomerulare.

La formazione e la circolazione di complessi antigene-anticorpo (ag-ac) generati da infezioni streptococciche può portare a modificazioni essudative e infiammazioni dei glomeruli, con proteinuria ed ematuria.

Questi complessi ag-ac si depositano nel glomerulo e attivano la cascata del complemento, provocando un danno endoteliale glomerulare. Per questo motivo è considerata una malattia autoimmune, poiché il sistema immunitario dell'individuo danneggia i propri tessuti.

Gli anticorpi antistreptolisina O sono molto alti ei livelli del complemento sono bassi.

Riferimenti

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