ROSSO FENOLO: CARATTERISTICHE, PREPARAZIONE, APPLICAZIONI - BIOLOGIA - 2025

Il rosso fenolo è una sostanza di natura organica avente la proprietà di cambiare colore quando passa da alcalino ad acido e viceversa. Per questa caratteristica viene utilizzato come indicatore acido-base. È anche conosciuto con il nome di fenolsulfonftaleina e la sua formula chimica è C ₁₉ H ₁₄ O ₅ S.

Questo indicatore di pH è giallo sotto 6,8 e rosso sopra 8,4. Questa sostanza non è cancerogena, ma è in grado di irritare la pelle e le mucose. Il rosso fenolo è uno degli indicatori di pH più utilizzati nei laboratori.

Struttura chimica del rosso fenolo. Colori secondo pH. Fonte: File: Phenol-red-zwitterionic-form-2D-skeletal.png. Wikipedia.com/Pxqui. Immagine modificata.

Viene utilizzato nella preparazione di importanti test biochimici nella diagnosi e identificazione di microrganismi batterici. I test biochimici e i terreni di coltura che utilizzano il rosso fenolo come indicatore di pH includono: agar Triple Sugar Iron (TSI), Kligler, urea, agar salato al mannitolo, agar XLD, agar verde brillante e Agar Vogel-Johnson.

Il rosso fenolo è stato utilizzato anche nella diagnosi delle infezioni da Helicobacter pylori attraverso la metodologia diagnostica nota come cromoendoscopia.

Recentemente, è stato scoperto che il rosso fenolo ha attività estrogenica, a causa della sua struttura simile. Pertanto, si lega ai recettori degli estrogeni presenti in alcune cellule.

Questa scoperta fa sì che l'uso del rosso fenolo nella preparazione di terreni di coltura cellulare venga riconsiderato quando si devono utilizzare cellule sensibili agli ormoni.

caratteristiche

L'indicatore rosso fenolo è caratterizzato dall'essere una polvere formata da minuscole particelle cristalline di un colore rosso scuro brillante. In soluzione il liquido è traslucido e di colore rosso chiaro. È solubile in idrossidi alcalini e carbonati, ma è moderatamente solubile in acqua, alcol etilico e acetone e insolubile in cloroformio.

La sua massa molecolare è 354,59 g / mol e il suo punto di fusione è 285 ° C. La sua densità è 0,972.

Preparazione

Per preparare la soluzione è necessario pesare 0,10 g di rosso fenolo e scioglierlo in 14,2 ml di NaOH (idrossido di sodio) 0,020 M. Quindi portare con acqua distillata fino ad un volume finale di 250 ml.

Va conservato a temperatura ambiente, in un luogo asciutto e ben ventilato.

applicazioni

Come indicatore di pH

Il suo utilizzo principale è limitato all'aggiunta ai terreni di coltura per la diagnosi e l'identificazione di microrganismi batterici. L'indicatore di pH rosso fenolo è incluso in quei mezzi in cui si desidera mostrare se il microrganismo è stato in grado di fermentare determinati carboidrati.

La fermentazione dei carboidrati genera la formazione di acidi. Pertanto, le colonie e il terreno di coltura diventeranno gialli. Se invece non c'è fermentazione dei carboidrati, il microrganismo utilizzerà i peptoni presenti. Questo alcalinizza il mezzo, che diventerà rosso.

I test biochimici che utilizzano il rosso fenolo includono quanto segue: mezzo TSI (triple sugar iron), Kligler e brodo rosso fenolo. Mentre i terreni di coltura selettivi e differenziali che utilizzano il rosso fenolo sono l'agar salato al mannitolo, l'agar XLD, l'agar verde brillante e l'agar Vogel-Johnson.

D'altra parte, il test dell'urea utilizza anche il rosso fenolo come indicatore di pH, ma in questo caso ciò che vogliamo mostrare è se il microrganismo è in grado di scindere l'urea, che genera un prodotto che alcalinizza leggermente il mezzo. (ammoniaca). In questo caso c'è un viraggio del colore al fucsia.

Nel caso in cui l'ureasi non sia presente, il terreno rimarrà dello stesso colore.

Cromoendoscopia con rosso fenolo

Hernández et al.hanno utilizzato l'indicatore rosso fenolo allo 0,1% più il 5% di urea per valutare la mucosa gastrica e diagnosticare la presenza di Helicobacter pylori. Questa tecnica è chiamata cromoendoscopia e fa parte dei cosiddetti test reattivi.

Questa tecnica ha il vantaggio di individuare in modo efficiente il sito delle lesioni, evitare contaminazioni ed essere immediatamente leggibile. La colorazione gialla viene interpretata come negativa e la colorazione rosso-fucsia viene interpretata come una reazione positiva.

Ricerca che coinvolge l'indicatore di pH rosso fenolo

Diverse indagini hanno dimostrato che il rosso fenolo ha una struttura chimica simile a quella di alcuni estrogeni non steroidei; e nei terreni di coltura tissutale ha attività estrogenica, poiché ha la proprietà di legarsi al recettore degli estrogeni quando si trova a concentrazioni comprese tra 15-45 µg.

In particolare, è stato scoperto che si lega in modo efficiente al recettore degli estrogeni delle cellule di cancro al seno umano MCF-7, con un'affinità dello 0,001%.

Ciò rappresenta una scoperta molto importante, poiché i ricercatori hanno cercato di ottenere mezzi cellulari privi di estrogeni in modo che le cellule non vengano stimolate. Per questo avevano cercato di eliminare gli estrogeni dal siero, ma non avrebbero mai immaginato che una sostanza che faceva parte del terreno di coltura potesse simulare l'azione ormonale.

Pertanto, a questo proposito, l'uso di terreni di coltura cellulare contenenti rosso fenolo dovrebbe essere riconsiderato quando si utilizzano cellule sensibili agli estrogeni.

Tossicità

Per la manipolazione del rosso fenolo, si raccomanda l'uso di strumenti e misure di biosicurezza.

In caso di fuoriuscita accidentale è necessario raccogliere la sostanza meccanicamente con materiali assorbenti. Smaltire in un contenitore appropriato. Non dovrebbe essere versato nello scarico.

rischi

La NFPA (National Fire Protection Association) classifica il rosso fenolo come rischio per la salute 2. Ciò significa un rischio moderato. D'altra parte, in termini di infiammabilità e reattività è classificato rispettivamente come 1 e 0; cioè, c'è un leggero rischio di infiammabilità e non c'è rischio di reattività.

Per quanto riguarda i danni causati dal rosso fenolo al contatto diretto, possiamo citare l'irritazione della pelle e della mucosa oculare. Allo stesso modo, è dannoso se ingerito solo in grandi quantità. Non è pericoloso inalare e non è cancerogeno.

Primo soccorso

In caso di contatto con la pelle e le mucose, si consiglia di lavare la zona interessata con abbondante acqua per 15 minuti, sollevando le palpebre.

A livello della pelle, una crema emolliente può essere applicata sulla zona interessata per alleviare l'irritazione. Se l'irritazione persiste, è necessario consultare un medico.

In caso di lieve ingestione, sciacquare la bocca. Se l'ingestione era di volume considerevole, è essenziale cercare assistenza medica immediata. Non provocare il vomito e non somministrare latte.

Incompatibilità con altre sostanze

Bisogna fare attenzione che il rosso fenolo non venga a contatto con le seguenti sostanze con le quali è incompatibile: perclorati, perossidi, permanganati, fosfuri, stagno II, cloruro metallico e idruri. Con tutti loro può reagire violentemente (esplosivamente) e provocare un incendio.

Riferimenti

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