CARY BLAIR MEDIUM: RAZIONALE, PREPARAZIONE E USI - BIOLOGIA - 2025

Il Cary Blair medio è un agar semisolido, utilizzato per il trasporto e la conservazione di campioni biologici che ospitano patogeni intestinali, microrganismi e anaerobici labili. Come tutti i mezzi di trasporto, la sua funzione è quella di mantenere il campione in condizioni ottimali fino alla sua coltivazione. I microrganismi patogeni presenti, così come il microbiota di accompagnamento, devono rimanere vitali, ma senza aumentare la loro popolazione.

Cary Blair Medium è il risultato del cambio di formulazione di Stuart Transport Medium. La modifica è stata effettuata nel 1964 e consisteva nella sostituzione del sistema di regolazione del pH (glicerofosfato) con un tampone inorganico fosfatato.

A. Culturette con Cary Blair Medium B. Sgabello Collector con Cary Blair Medium. Fonte: A. Video Meganhow, ottieni una cultura della ferita 2011 su youtube.com B. Utente: Mattes

La riformulazione è stata necessaria perché i suoi ideatori hanno capito che il glicerofosfato dopo un certo tempo poteva essere metabolizzato da alcuni batteri saprofiti. Questi si sovrappongono moltiplicando i patogeni presenti.

Altre modifiche sono state l'eliminazione del blu di metilene, nonché un riaggiustamento del pH verso l'alcalinità (pH 8,4). Tutti questi cambiamenti hanno migliorato l'efficienza dei mezzi di trasporto.

Originariamente il terreno Cary Blair veniva utilizzato per il mantenimento di patogeni intestinali, come Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae e Campylobacter sp.

Tuttavia, è stata successivamente osservata l'efficacia nel preservare la vitalità di patogeni esigenti e labili, come: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae e alcuni anaerobi.

Base

Cary Blair Medium contiene sodio cloruro, sodio tioglicolato, disodio fosfato, calcio cloruro e agar.

Il cloruro di sodio mantiene l'equilibrio osmotico del terreno, il fosfato disodico e il cloruro di calcio bilanciano il pH. Da parte sua, il tioglicolato di sodio mantiene un basso potenziale di riduzione dell'ossidazione, mentre la piccola porzione di agar fornisce la consistenza semisolida.

Il terreno Cary Blair non contiene sostanze nutritive, poiché la funzione di un mezzo di trasporto è quella di trattenere il campione senza che questo subisca variazioni in termini di umidità e carica microbica; ovvero evita la disidratazione del campione preservando la vitalità e la quantità dei microrganismi presenti.

Infine, il pH leggermente alcalino impedisce la morte dei microrganismi per acidità, in particolare i Vibrio sono molto sensibili agli acidi.

Preparazione

Il terreno Cary Blair è disponibile in commercio come dispositivo speciale pronto per l'uso. Il sistema di trasporto è coperto da una busta di plastica Peel Pack. Al suo interno contiene un tampone per la raccolta del campione e il tubo contenitore per il terreno semisolido di Cary Blair.

Inoltre nel mercato ci sono case commerciali che forniscono il mezzo disidratato per la sua preparazione in laboratorio.

Per fare questo, pesare 13,2 g del mezzo disidratato e scioglierlo in un litro di acqua distillata. Riscaldare e agitare la preparazione fino a completa dissoluzione. Distribuire il terreno in provette con tappo a vite (bachelite).

Cuoci a vapore le provette per 15 minuti. Lasciate raffreddare e mantenete a temperatura ambiente fino al momento dell'uso.

Il terreno Cary Blair non inoculato può essere conservato in modo ottimale per un massimo di 18 mesi a temperatura ambiente.

Il pH del mezzo deve essere regolato a 8,4 ± 0,2. Il colore del terreno preparato è beige, con una certa opalescenza.

Uso

Tipo di campioni

Cary Blair Medium viene utilizzato quando i campioni di feci, i tamponi rettali e i tamponi vaginali non possono essere processati immediatamente.

Quando non è disponibile alcun mezzo di trasporto, i campioni possono essere conservati a -70 ° C.

campionatura

Il tampone viene impregnato con il campione e viene introdotto nel terreno Cary Blair, senza raggiungere il fondo.

Identificazione del campione

Il terreno Cary Blair deve avere un'etichetta in cui sono posti i dati di base, come: nome e cognome del paziente, numero di identificazione del campione, fonte della raccolta del campione, medico curante, data e ora della raccolta. campione, diagnosi presuntiva, trattamento antibiotico.

Trasferimento

Coperto ermeticamente e trasportato a temperatura ambiente nel caso di campioni fecali. Considerando che, per i campioni vaginali alla ricerca di microrganismi anaerobi, si consiglia di trasportare i campioni a 4 ° C.

In tutti i casi, il tempo di trasferimento consigliato è di 4-6 ore, con un massimo di 24 ore.

Se si sospetta la presenza di Campylobacter jejuni nei campioni di feci e questi non possono essere processati entro 24 ore, si raccomanda la conservazione in terreno Cary Blair a 4 ° C.

Indagini condotte sui mezzi di trasporto Cary Blair

Diversi studi hanno dimostrato che il terreno Cary Blair può rimanere vitale per i microrganismi enteropatogeni del genere Shigella e Salmonella fino a 49 giorni dopo il prelievo del campione.

Il Vibrio cholerae, un altro importante patogeno intestinale, è in grado di sopravvivere per 22 giorni, mentre la Yersinia pestis (agente eziologico della peste bubbonica e polmonare) può essere guarita dopo 75 giorni.

Tuttavia, nonostante la durata dimostrata in termini di recupero di questi microrganismi, si raccomanda di trasportare i campioni prelevati nel terreno Cary Blair al laboratorio il più rapidamente possibile.

Allo stesso modo, una volta che il campione raggiunge il laboratorio, deve essere seminato senza indugio nei rispettivi terreni di coltura.

D'altra parte, il terreno Cary Blair, oltre ad essere utile per il trasporto di microrganismi facoltativi, è consigliato anche per campioni che contengono patogeni anaerobici.

In questo senso, DeMarco et al.Nel 2017 hanno condotto uno studio dal titolo: Sopravvivenza dei microrganismi vaginali in tre sistemi di trasporto disponibili in commercio.

Hanno dimostrato che il terreno di trasporto Cary Blair è il miglior mezzo di trasporto per la conservazione e il recupero dei microrganismi anaerobici vaginali. Allo stesso modo, hanno dimostrato che la velocità di recupero più elevata è stata raggiunta quando la temperatura di trasferimento era di 4 ° C.

Pertanto, si conclude che la temperatura di trasporto per i tamponi vaginali (microrganismi anaerobici) dovrebbe essere di 4 ° C. Mentre per i campioni fecali alla ricerca di microrganismi facoltativi, la temperatura ideale è la temperatura ambiente.

QA

Per valutare il controllo di qualità del terreno di trasporto Cary Blair, i ceppi noti come Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae e Campylobacter sp.

Il terreno viene inoculato con il ceppo scelto e mantenuto a temperatura ambiente per 24 ore. Vengono quindi seminati nei corrispondenti terreni di coltura. In tutti i casi, è previsto un soddisfacente recupero del microrganismo in questione.

Riferimenti

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. Sopravvivenza dei microrganismi vaginali in tre sistemi di trasporto disponibili in commercio. Anaerobe. 2017; 45: 44–49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Confronto dei mezzi di conservazione per la conservazione dei campioni di feci. J Clin Microbiol. 1995; 33 (8): 2176–2178.
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6. Laboratori Conda Pronadisa. Mezzo Cary Blair. Disponibile su: condalab.com
7. Metrix Laboratory. Cary Blair. Disponibile a: metrixlab.mx