TERRENI DI COLTURA SELETTIVI: FONDOTINTA, SOLIDI E LIQUIDI - BIOLOGIA

I terreni di coltura selettivi sono brodi e agar quelli che servono per l'isolamento di un gruppo definito di microrganismi, mentre inibiscono lo sviluppo di altri. Sono ideali per la semina di campioni polimicrobici, consentendo il recupero del patogeno dal microbiota associato.

Esiste una grande varietà di mezzi selettivi, tra solidi e liquidi. Alcuni sono destinati all'isolamento di batteri Gram positivi, come Staphylococcus coagulasi positivo, Lactobacillus, Bifidobatteri, ecc.

Terreni di coltura selettivi. Fonte: Air1404

Altri per il recupero di patogeni Gram negativi, come le specie dei generi Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas, tra gli altri.

Così come ci sono anche per favorire la crescita di funghi e lieviti, come specie Candida, Histoplasma, Cryptococcus, dermatofiti, tra gli altri.

Va notato che alcuni terreni arricchiti non selettivi possono diventare selettivi con l'aggiunta di antibiotici. Allo stesso modo, alcuni terreni di coltura possono essere selettivi e differenziali allo stesso tempo.

D'altra parte, ci sono terreni di coltura liquidi selettivi; alcuni possono fungere da terreni di arricchimento, favorendo l'esacerbazione di un gruppo selettivo di batteri, sopprimendo quello di altri.

I terreni di coltura selettivi sono ampiamente utilizzati nei laboratori di microbiologia per l'analisi di vari tipi di campioni; nonché per l'isolamento di una grande varietà di microrganismi di interesse clinico, industriale, ambientale e alimentare.

Base

I terreni di coltura selettivi si basano sul contenere sostanze nutritive che favoriscono la crescita di uno specifico batterio o fungo o di un certo gruppo di questi, e allo stesso tempo devono contenere sostanze inibitorie che non permettano lo sviluppo di altri microrganismi indesiderati.

Tra le sostanze nutritive che possono contenere ci sono: digestato pancreatico di caseina, estratto di lievito, polipeptoni, tra gli altri.

Le sostanze inibenti includono: antibiotici, sali biliari, verde brillante, violetto cristallino, fucsina basica, eosina, blu di metilene, sodio desossicolato, solfito di sodio, sorbitano monoleato, citrato di ammonio, cetrimide, cloruro di litio, tellurito di potassio , verde malachite, tra gli altri.

A volte i media possono essere sia selettivi che differenziali. Allo stesso modo, il grado di selettività varia da un mezzo all'altro.

Alcuni sono altamente selettivi, caratterizzati da condizioni di estrema ostilità per la maggior parte dei microrganismi e dove solo un piccolo numero di specie è in grado di resistere alle condizioni presenti nell'ambiente e quindi di crescere in modo soddisfacente. Ad esempio, TCBS agar e MRS agar, tra gli altri.

Mentre altri sono moderatamente selettivi, cioè quelli che inibiscono un gruppo specifico di microrganismi, come i batteri Gram positivi. D'altra parte, favoriscono la crescita di una grande varietà di batteri Gram negativi; ad esempio, Mac Conkey agar.

Esistono infine terreni di coltura a basso potere selettivo, ovvero sono quelli che permettono la crescita di una grande varietà di batteri tra Gram positivi e Gram negativi, oltre ad alcuni lieviti, inibendo solo un piccolo gruppo di microrganismi. Esempio: agar EMB.

Terreni di coltura solidi selettivi

Agar Baird-Parker

Terreno progettato per la rilevazione di stafilococchi coagulasi positivi (Staphylococcus aureus). Contiene come sostanze inibitorie cloruro di litio e tellurito di potassio.

BCYE Agar o Yeast Charcoal Extract Buffered Agar

È un terreno di coltura altamente arricchito, soprattutto per l'isolamento delle specie Legionella e Nocardia. Questo terreno diventa selettivo con l'aggiunta di antimicrobici come la polimixina B, la vancomicina e l'anisomicina.

Agar BHI con antibiotici

L'agar BHI è originariamente un terreno arricchito, ma se vengono aggiunti cloramfenicolo e cicloesimide, è ideale per l'isolamento selettivo di funghi di interesse clinico.

BIGGY agar

Terreno selettivo e differenziale per l'isolamento delle specie Candida. Contiene citrato di ammonio, bismuto e solfito di sodio, che agiscono come inibitori della crescita batterica.

Bordet Gengou Agar

Terreno di coltura arricchito e selettivo, soprattutto per l'isolamento di B ordetella pertussis e Bordetella parapertussis. Contiene cefalexina per inibire la flora associata.

Campy agar con sangue

Terreno utilizzato per l'isolamento del genere Campylobacter. Contiene cefoperazone, vancomicina e amfotericina B per inibire la crescita di batteri Gram negativi, Gram positivi e funghi.

Campylobacter Butzler Agar

Terreno speciale per l'isolamento di specie del genere Campylobacter. È integrato con sangue di cavallo, tra gli altri nutrienti. Contiene anche varie sostanze inibitorie, come novobiocina, colistina, cefazolina, bacitracina e cicloesimide.

Campylobacter Skirrow Agar

Terreno selettivo per l'isolamento delle specie Campylobacter. Contiene sangue di cavallo e altri nutrienti. Come sostanze inibitorie contiene vancomicina, polimixina B e trimetoprim.

Agar CCF o agar fruttosio, cicloserina, cefoxitina

Come suggerisce il nome, contiene cicloserina e cefoxitina come sostanze inibitorie e viene utilizzato per l'isolamento del Clostridium diffcile nei campioni di feci, tra gli altri campioni intestinali.

Agar cetrimide

Terreno selettivo, studiato per l'isolamento di Pseudomonas aeruginosa, favorendo la produzione di pigmenti. La cetrimide (bromuro di cetil trimetilammonio) è la sostanza che inibisce la crescita di batteri diversi da P. aeruginosa.

Agar cioccolato con isovitalex e vancomicina

Questo mezzo è originariamente molto arricchito. L'aggiunta di vancomicina è utile per l'isolamento selettivo dei ceppi di Neisseria gonorrhoeae e N. meningitidis.

Agar CIN o agar cefsulodina, irgasan, novobiocina

È un terreno di coltura moderatamente selettivo per l'isolamento delle specie Yersinia.

Agar CNA (colistina, acido nalidixico)

È uno speciale terreno selettivo per l'isolamento di batteri Gram positivi come Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus e lieviti, ma inibisce lo sviluppo di batteri Gram negativi come Pseudomonas e specie della famiglia Enterobacteriaceae.

Agar Czapek

Terreno studiato per la coltivazione di batteri e funghi saprofiti. Questo terreno contiene azoto inorganico. Per questo motivo, questo terreno è considerato selettivo, poiché possono svilupparsi solo microrganismi in grado di utilizzare composti inorganici come unica fonte di azoto.

Agar EMB

Terreno leggermente selettivo e differenziale, utilizzato per l'isolamento di Enterobacteriaceae. L'Escherichia coli è particolarmente rilevato su questo terreno dal colore nero-verdastro lucido delle sue colonie. Il grado di selettività che possiede è dovuto alla presenza di coloranti all'anilina (eosina e blu di metilene).

Endo agar

Terreno minimamente selettivo e differenziale, utilizzato per l'isolamento e la differenziazione di bacilli Gram negativi fermentanti e non fermentanti il lattosio appartenenti alla famiglia delle Enterobacteriaceae e ad altre famiglie.

Il solfito di sodio e la fucsina basica inibiscono la maggior parte dei batteri Gram positivi. Escherichia coli su questo terreno produce tipiche colonie rosso scuro con una lucentezza metallica verdastra iridescente.

Agar Hektoen

Terreno selettivo e differenziale per l'isolamento di batteri enteropatogeni dei generi Shigella e Salmonella. Come sostanza inibitoria contiene sali biliari, sopprimendo lo sviluppo di batteri Gram positivi e alcuni Gram negativi.

Agar Löwenstein-Jensen

Terreno appositamente progettato per l'isolamento e lo sviluppo di batteri del genere Mycobacterium, in particolare le specie di tubercolosi, tra gli altri.

Il terreno contiene verde malachite; Questa sostanza inibisce la flora Gram positiva e Gram negativa che è stata in grado di resistere alla precedente disinfezione del campione. Contiene anche glicerina che stimola la crescita di M. tuberculosis, ma inibisce la crescita di M. bovis e altri microrganismi.

Agar Mac Conkey

È un terreno selettivo e differenziale. Viene utilizzato per l'isolamento di bastoncini Gram negativi non esigenti, fermentanti e non fermentanti al lattosio.

Il suo carattere selettivo è fornito dalla presenza di sali biliari e violetto cristallino. Queste sostanze inibiscono la crescita dei batteri Gram positivi e di alcuni fastidiosi bastoncini Gram negativi.

Agar salato al mannitolo

Agar selettivo e differenziale per l'isolamento di Staphylococcus aureus. Questo terreno ha un'alta concentrazione di cloruro di sodio che inibisce la crescita della maggior parte dei batteri.

SS agar

Terreno moderatamente selettivo e differenziale per l'isolamento dei generi Salmonella e Shigella. Il terreno contiene sostanze inibitorie, come sali biliari, citrato di sodio e verde brillante. Queste sostanze sopprimono la crescita di batteri Gram positivi, alcuni batteri Gram negativi e alcuni coliformi.

Regan Lowe Agar

Agar selettivo per l'isolamento di Bordetella pertussis. Il terreno contiene carbone, cefalexina e amfotericina B come sostanze inibitorie.

Agar SABHI

Terreno selettivo per l'isolamento di funghi patogeni, come dermatofiti, Blastomyces dermatitidis e Histoplasma capsulatum. Contiene cloramfenicolo.

Agar sangue di cavallo con bacitracina

Terreno speciale per l'isolamento di Haemophilus influenzae. La bacitracina inibisce la flora associata.

Agar carbone sangue di cavallo

Terreno selettivo utile per il recupero dei ceppi di Bordetella pertussis e B. parapertussis da campioni clinici. Contiene cefalexina per inibire la flora associata.

Agar sangue Kanamicina-vancomicina (KV)

Terreno selettivo, speciale per l'isolamento di batteri anaerobici, come Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium e Veillonella.

Bismuth Sulfite Agar

Terreno selettivo per l'isolamento di Salmonella enterica sottogruppo enterica sierotipo Typhi. Questo terreno contiene solfito di bismuto verde brillante per inibire la crescita di microrganismi Gram positivi e alcuni batteri Gram negativi.

Agar TCBS (tiosolfato, citrato, sali biliari)

Terreno altamente selettivo per l'isolamento di specie del genere Vibrio. Contiene citrato di sodio, bile di bue e un pH alcalino che inibisce la flora associata.

Agar Thayer-Martin

Terreno altamente nutriente e selettivo per l'isolamento di Neisseria meningitidis e Neisseria gonorrhoeae. La flora associata è inibita dalla presenza di vancomicina, colistina e nistatina.

Agar verde brillante

Terreno selettivo per l'isolamento di ceppi del genere Salmonella. Come suggerisce il nome, contiene verde brillante come sostanza inibitrice. Ciò impedisce la crescita di batteri Gram positivi e un gran numero di microrganismi Gram negativi.

Agar Vogel-Johnson

È un terreno di coltura selettivo e differenziale, formulato per l'isolamento di Staphylococcus aureus e inibisce la crescita dei batteri Gram negativi e anche di alcuni Gram positivi. Le sostanze inibitrici sono tellurite di potassio, cloruro di litio e glicina.

Agar XLD

È un terreno selettivo e differenziale per l'isolamento di enteropatogeni di Salmonella e Shigella. Il sodio desossicolato conferisce il carattere selettivo al terreno.

CHROMagar (Candida Medium)

È un terreno selettivo e differenziale per aiutare l'isolamento e l'identificazione delle specie di Candida. Il terreno contiene cloramfenicolo per inibire la crescita dei batteri.

Middle Ellinghausen McCulough Johnson e Harris (EMJH)

Terreno selettivo per la coltivazione di Leptospiras. Contiene polisorbato 80, che inibisce la crescita della maggior parte dei batteri.

Terreni di coltura liquidi selettivi

Brodo BHI NaCL 6,5%

Brodo selettivo per il recupero di Enterococcus. L'alta concentrazione di cloruro di sodio inibisce la crescita del microbiota di accompagnamento.

Brodo CE

Brodo selettivo per il recupero dei coliformi totali e fecali. Contiene sali biliari che inibiscono la crescita di altri microrganismi.

Brodo GN

Brodo selettivo per il recupero di Salmonella e Shigella. Contiene citrato di sodio e desossicolato di sodio, che inibiscono i batteri Gram positivi e i coliformi.

Brodo Rappaport-Vassiliadis

È un terreno di arricchimento selettivo per le specie Salmonella. Contiene verde malachite come sostanza inibitrice.

Brodo di selenite

È un terreno di coltura selettivo, utile per l'arricchimento di campioni dove si sospetta la presenza di batteri enteropatogeni del genere Salmonella.

Come suggerisce il nome, contiene selenito di sodio come sostanza inibitoria, che sopprime la crescita dei batteri Gram positivi e della maggior parte dei batteri nel tratto gastrointestinale.

Brodo tetrationato

Brodo selettivo per l'arricchimento e il recupero di ceppi del genere Salmonella.

Il tetrationato formato dalla reazione generata tra il tiosolfato di sodio e la soluzione iodata presente nel terreno inibisce la crescita dei coliformi e favorisce lo sviluppo di batteri che contengono l'enzima tetrationato reduttasi (Salmonella).

Contiene anche sali biliari e alcune varietà includono il verde brillante; entrambe le sostanze inibiscono la maggior parte dei batteri Gram positivi e alcuni Gram negativi (coliformi).

Campy Thioglycollate Broth

Brodo speciale per promuovere lo sviluppo di C. jejuni subsp jejuni. Contiene amfotericina B, cefalotina, polimixina B, trimetropim e vancomicina.

Brodo Todd-Hewitt con sangue e antibiotici

Serve per arricchire i campioni e favorire lo sviluppo di Streptococcus agalactiae dalle secrezioni vaginali. Come sostanze inibitorie contiene acido nalidixico e gentamicina o colistina.

Riferimenti

Terreni di coltura microbiologici clinici (anno accademico 2012-2013). Disponibile su: asignatura.us.es
BD Laboratories. Campylobacter Skirrow Agar e Campylobacter Butzler Agar. 2013, disponibile su: bd.com
Laboratori IVD. Löwenstein-Jensen. Disponibile su: bio-rad.com
Neogen Laboratories. Brodo GN (Hajna). Disponibile su: foodsafety.neogen.com
BD Laboratories. CHROMagar. Candida Medium 2014, disponibile su: bd.com
BD Laboratories. Brodo Rappaport Vassiliadis. 2003, disponibile su: bd.com
Portale Web Lifeder.com. Disponibile su: Lifeder.com
BD Laboratories. Leptospira Medium Base EMJH2011 Disponibile su: http://legacy.bd.com
Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosi microbiologica. 5a ed. Editoriale Panamericana SA Argentina.
Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Microbiological Diagnosis. 12 ed. Editoriale Panamericana SA Argentina.

TERRENI DI COLTURA SELETTIVI: FONDOTINTA, SOLIDI E LIQUIDI - BIOLOGIA - 2025