TERRENO DI COLTURA ARRICCHITO: CARATTERISTICHE, TIPI, USI - BIOLOGIA - 2025

Il terreno di coltura arricchito consiste nella combinazione di un agar nutriente come base più una sostanza o un composto arricchito. I terreni arricchiti per eccellenza sono l'agar sangue e l'agar cioccolato.

Entrambi i terreni possono essere preparati con una semplice base di qualsiasi agar nutriente, come agar nutriente, trypticasein soy agar o brain heart infusion agar, tra gli altri. Allo stesso modo, entrambi i terreni sono integrati con un elemento altamente arricchito che è il sangue, con la differenza che nel primo caso viene utilizzato defibrinato e nel secondo caso viene utilizzato riscaldato.

Due piastre di agar sangue (terreno di coltura arricchito) che mostrano beta-emolisi. Fonte: Pixabay.com

Questi terreni non contengono inibitori, quindi un'ampia varietà di microrganismi può crescere su di essi, inclusi alcuni ceppi nutrizionalmente esigenti. In quei casi che sono già estremamente impegnativi richiedono, oltre al sangue, altri speciali additivi nutrizionali, che devono essere aggiunti al terreno in cui si intende isolare.

D'altra parte, se a un terreno arricchito vengono aggiunti antibiotici o altre sostanze inibitorie, questo diventa immediatamente un terreno arricchito selettivo. Questi ultimi sono necessari quando si cerca di isolare microrganismi altamente esigenti da un'area ricca di microbiota, come Haemophilus sp e Neisseria meningitidis isolati da un campione di essudato rinofaringeo.

caratteristiche

Questi terreni hanno una base nutrizionale composta da peptoni, estratti di lievito, digestato pancreatico e talvolta glucosio, tra gli altri. Contiene anche sostanze che bilanciano il pH, l'acqua e l'agar-agar.

D'altra parte, è possibile aggiungere sangue defibrinato o riscaldato e a loro volta possono essere inclusi fattori di crescita specifici, come: complessi vitaminici, biotina, acido para-ammino benzoico, emina, NAD, tra gli altri.

Differenze tra mezzi di coltura e mezzi di arricchimento

È importante sottolineare che i terreni di coltura arricchiti non devono essere confusi con i terreni di arricchimento. Sebbene entrambi contengano nutrienti e requisiti nutrizionali speciali, i terreni di arricchimento sono liquidi e vengono utilizzati come pretrattamento di campioni in cui si sospetta la presenza di un tipo di batterio patogeno che si trova in misura minore all'interno di una miscela polimicrobica.

Il mezzo di arricchimento inibirà i microrganismi che non appartengono a questo gruppo e promuoverà la crescita del patogeno.

Inoltre hanno la proprietà di riparare i danni alla struttura cellulare del microrganismo da recuperare, poiché normalmente può essere influenzato da precedenti trattamenti ricevuti e in questo senso il mezzo agisce aumentandone la vitalità.

Tipi e usi dell'agar arricchito

L'agar arricchito più utilizzato è l'agar sangue, ma questo può essere preparato con diverse basi nutrizionali ea seconda di esso la sua utilità cambia.

D'altra parte, c'è anche l'agar cioccolato, che è un mezzo arricchito per eccellenza. Tuttavia, come l'agar sangue, può essere preparato con varie basi nutrizionali, oltre a includere altri additivi per l'isolamento di microrganismi esigenti.

Di seguito è riportato un riepilogo delle basi di agar più utilizzate per preparare agar sangue e agar cioccolato, nonché la loro utilità in ciascun caso.

- Agar sangue

Cultura su agar sangue del batterio anaerobico facoltativo Morganella morganii. Tratto e modificato da: Bacteria in Photos.

Preparato con:

Base di agar nutriente

Viene utilizzato per batteri non esigenti, come: Enterobacteriaceae, Pseudomonas sp, S. aureus, Bacillus sp, tra gli altri. Non è adatto per batteri esigenti come lo streptococco.

Base di agar per infusione di cuore e cervello

L'agar sangue con questa base è eccellente per la maggior parte dei batteri, compreso lo Streptococcus sp, ma non è raccomandato per l'osservazione dei modelli di emolisi. Questa combinazione con alcuni additivi è utile per alcuni microrganismi. Esempi:

Se a questo terreno vengono aggiunti cistina e glucosio, viene utilizzato per isolare Francisella tularensis. Se invece si aggiunge la cistina tellurite è utile isolare il Corynebacterium diphteriae.

Allo stesso modo, questo terreno viene utilizzato per isolare i batteri del genere Haemophilus, ma in questo caso è necessario aggiungere bacitracina, amido di mais, sangue di cavallo e altri integratori di arricchimento come (IsoVitaleX).

Infine, se incluso nella sua preparazione (cloramfenicolo - gentamicina) o (penicillina - streptomicina) con sangue di cavallo, è ideale per l'isolamento di Histoplasma capsulatum.

Trypticasein Soy Agar Base

È eccellente per promuovere la crescita di un'ampia varietà di microrganismi, tra cui Streptococcus sp, essendo il più raccomandato per l'osservazione dei modelli di emolisi.

Se integrato con cistina tellurite e sangue di agnello è ideale per Corynebacterium diphteriae.

Müeller Hinton Agar Base

Ideale per antibiogrammi di microrganismi complicati come Streptococcus sp, nonché per l'isolamento di Legionella pneumophila.

Thayer Martin Agar Base

È ideale per isolare la specie Neisseria meningitidis.

Base di agar Columbia

È speciale per l'isolamento di Helicobacter pylori e Gardnerella vaginalis. Per un maggiore successo, vengono aggiunti diversi tipi di antibiotici per inibire il microbiota di accompagnamento.

Base di agar Brucella

La combinazione di sangue di agnello, vitamina K e agar Brucella è eccellente per la coltivazione di batteri anaerobici.

Base di agar Campylobacter

Come suggerisce il nome, questa base viene utilizzata per isolare Campylobacter jejuni nei campioni di feci. Per questo, è integrato con il 5% di sangue di pecora e cefalotina, amfotericina B, trimetoprim, polimixina B e vancomicina.

- Agar cioccolato

Agar cioccolato

Preparato con:

Base di agar Columbia

La preparazione dell'agar cioccolato con questa base è ampiamente utilizzata per isolare i batteri del genere Neisseria.

È consigliato anche per l'isolamento di Brucella sp, ma per questo è necessario aggiungere vitamina K e utilizzare sangue di cavallo.

Base agar base GC

È una delle basi consigliate per fare l'agar al cioccolato, soprattutto per l'isolamento dei gonococchi.

Müeller Hinton Agar Base

Alcuni microrganismi esigenti, come lo Streptococcus pneumoniae, richiedono questo terreno per poter eseguire il test di sensibilità antimicrobica.

È utile anche nell'isolamento di Neisserias e Haemophilus, con l'eccezione che il genere Haemophilus predilige il sangue di cavallo, poiché ricco di fattore X (emina) e V (NAD).

A volte è consigliabile includere antibiotici nella sua preparazione per inibire il microbiota di accompagnamento.

Base con agar Thayer Martin

Si consiglia l'uso di sangue di agnello per preparare l'agar cioccolato con questa base. Questo terreno è speciale per l'isolamento di Neisseria gonorrhoeae. Gli antibiotici vengono aggiunti per inibire il microbiota associato.

Agar cioccolato (terreno di coltura arricchito): Fonte: Pixinio.com

Riferimenti

1. Prescott M, Harley P, Klein A. Microbiology, 4 °. Editoriale McGraw-Hill Interamericana, 2003, Madrid, Spagna, pp 105-108.
2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott Microbiological Diagnosis. 12 ed. Argentina. Editoriale Panamericana SA
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosi microbiologica. (5a ed.). Argentina, Editoriale Panamericana SA
4. Jawetz E, Melnick J, Adelberg E. (1992). Microbiologia medica. (14 ^ta Edition) Messico, Editoriale El Manual Moderno.
5. González M, González N. 2011. Manuale di microbiologia medica. 2a edizione, Venezuela: Direzione dei media e delle pubblicazioni dell'Università di Carabobo.