EMOCOLTURA: A COSA SERVE, LOGICA, PROCEDURA, RISULTATI - BIOLOGIA - 2025

L' emocoltura è un test batteriologico che cerca di rilevare la presenza di microrganismi nel sangue. Il sangue è un liquido sterile per natura e quindi deve essere mantenuto in condizioni fisiologiche, quindi la presenza di batteri o funghi nel sangue è sempre patologica.

Quando si trovano batteri o funghi nel sangue, ma la moltiplicazione non supera l'eliminazione di microrganismi da parte del sistema immunitario, si parla di batteriemia (per i batteri) o fungemia (per i funghi); Ma se i microrganismi aumentano di numero in modo incontrollabile, si parla di setticemia.

Flaconi per emocoltura (giallo: aerobiosi pediatrica, verde: aerobiosi dell'adulto e rosso: anaerobiosi dell'adulto). Fonte: fotografia scattata dall'autore MSc Marielsa Gil.

Batteriemia, fungemia e setticemia mettono in pericolo la vita del paziente e pertanto devono essere trattate immediatamente. Questo è il motivo per cui, quando si sospetta un'infezione nel sangue, i medici richiedono uno studio di emocoltura.

Questa analisi batteriologica permette di sapere se c'è o meno un'infezione nel sangue e quale è il microrganismo coinvolto. Inoltre, se è positivo, viene eseguito un test di sensibilità per sapere quale antibiotico o antimicotico potrebbe essere utilizzato nel trattamento.

Se invece l'emocoltura è negativa a 24 ore di incubazione, non deve essere scartata fino a quando non è negativa per 240 ore. Ciò garantisce che non vi siano microrganismi a crescita lenta.

Affinché un'emocoltura sia affidabile, è necessario adottare misure asettiche estreme durante il prelievo del campione e per aumentare l'affidabilità e la sensibilità del test, è necessario prelevare almeno due campioni durante o vicino al picco di febbre.

Cosa serve?

Il sangue è un liquido sterile e quando in esso si trovano microrganismi è patologico al 100%. Questa situazione rappresenta un quadro clinico molto delicato che compromette la vita del paziente.

L'emocoltura è un importante test batteriologico che rileva la presenza di microrganismi nel flusso sanguigno.

I microrganismi possono raggiungere il sangue attraverso diverse vie, che potrebbero essere infezioni extravascolari come: polmonite, infezioni intra-addominali, pielonefrite, infezioni gravi della pelle, tessuti molli o artrite, tra le altre.

Oppure può anche essere per via endovenosa, ad esempio, contaminazione di cateteri endovenosi o arteriosi, endocardite, tossicodipendenza per via endovenosa, somministrazione di farmaci o soluzioni contaminati, ecc.

Rilevare e trattare l'agente eziologico della sepsi nel tempo è essenziale per garantire la sopravvivenza del paziente.

In questo senso, il medico dovrebbe indicare la realizzazione di un'emocoltura quando osserva segni e sintomi che fanno sospettare una setticemia, quali: febbre (maggiore di 38 ° C) senza apparente focolaio infettivo o, al contrario, ipotermia (<de 36 ° C).

Altri segni possono essere: brividi, aumento della conta dei globuli bianchi (> 10.000 cellule / mm ³ ) o diminuzione significativa delle cellule polimorfonucleate (<1.000 PMN / mm ³ ). Così come il deterioramento multiorgano o la perdita di vitalità improvvisa, tra gli altri segni premonitori.

La batteriemia può essere costante, transitoria o intermittente. Questo è importante quando si preleva un campione, poiché è necessario prenderlo quando c'è una maggiore probabilità di trovare il microrganismo circolante.

Pertanto si consiglia di prelevare almeno 2 campioni in luoghi diversi. Inoltre, l'ideale è che il campione venga prelevato in picchi febbrili o quando il paziente presenta brividi, ipotermia estrema, sudorazione o tachicardia.

Tuttavia, affinché l'emocoltura sia uno strumento veramente utile, il campione deve essere prelevato con estrema cura. Una cattiva manipolazione o una cattiva asepsi al momento del prelievo del campione può invalidare il test, ottenendo falsi positivi.

Base

Lo studio consiste nel prelevare due o tre campioni di sangue in modo asettico e metterli in appositi flaconi.

Dispositivi speciali per la coltura di campioni di sangue sono chiamati flaconi per emocoltura. Questi sono classificati in:

Secondo l'età del paziente

-Uso pediatrico

-Per adulti.

Secondo il tipo di microrganismo

-Tasche per microrganismi aerobici (batteri aerobi, batteri facoltativi e funghi).

-Bottiglie di coltura del sangue per microrganismi anaerobici (batteri anaerobici stretti).

Alcuni contengono un mezzo di coltura liquido e alcuni contengono un mezzo di coltura solido e liquido allo stesso tempo. Esistono anche con particelle di carbone attivo.

Processi

Raccomandazioni per il campionamento

- Il campione deve essere prelevato da personale altamente qualificato e formato nell'area della microbiologia.

- L'asepsi o la pulizia accurata del sito di raccolta dei campioni è senza dubbio il passaggio più importante.

- Come per tutti i campionamenti, il personale sanitario deve rispettare pienamente le misure di biosicurezza durante il processo (uso di guanti, camice, occhiali, tra gli altri).

- Fare attenzione che siano disponibili tutti gli strumenti necessari per il prelievo dei campioni.

- Etichettare le fiale con il nome completo del paziente, la data, il numero di cartella clinica, l'ora di raccolta del campione e il numero di sequenza del laboratorio.

-L'ideale è prelevare il campione prima che il paziente inizi la terapia antimicrobica. Viene indicato solo nel caso in cui si sospetti il ​​mancato funzionamento del trattamento in corso. In questo caso, il campione deve essere prelevato prima del cambio di farmaco, utilizzando flaconi di emocoltura con inibitori antibiotici (particelle di carbone attivo).

- Almeno 2 campioni devono essere prelevati in diversi siti anatomici, come il braccio destro e il braccio sinistro. In caso di sospetta endocardite, si raccomandano 3 campioni. In ogni campione saranno inclusi due flaconi (uno per aerobiosi e uno per anaerobiosi).

Quantità campione

La quantità di campione varia in base all'età del paziente, ma va sempre mantenuto il rapporto da 1: 5 a 1:10 rispetto alla diluizione del sangue / brodo di coltura.

Nei neonati, la quantità di campione raccomandata è di 1 ml di sangue per fiala. Viene utilizzato il flacone pediatrico.

Nel caso di lattanti tra un mese e un anno, può essere aumentata a 1,5 ml di sangue per flacone. Viene utilizzato il flacone pediatrico.

Nei bambini di età superiore a 2 anni la quantità appropriata di campione è di 2,5 ml di sangue per flaconcino. Viene utilizzato il flacone pediatrico.

Dall'adolescenza può essere aumentato fino a un volume di sangue compreso tra 5 e 10 ml per flacone. Viene utilizzata una bottiglia per adulti.

Infine, nella fase adulta, la quantità necessaria è di 8-10 ml per bottiglia. Viene utilizzata una bottiglia per adulti.

campionatura

- Il campione di sangue può essere venoso o arterioso. Tuttavia, il sangue arterioso viene prelevato solo quando il prelievo venoso è impossibile.

- Si sconsiglia di prelevare un campione da un catetere venoso centrale a meno che:

1. È impossibile prelevare il campione per via periferica (venosa o arteriosa).
2. Pazienti a rischio di sanguinamento.
3. Quando il medico sospetta una batteriemia dovuta alla contaminazione del catetere venoso centrale.
4. Quando la febbre ricompare dopo una cessazione febbrile di 4-5 giorni, indipendentemente dal fatto che il paziente sia o meno in trattamento antimicrobico.

Asepsi prima del campionamento

- Scegli i siti anatomici per il campionamento. Generalmente si scelgono le vene del calibro migliore (vena basilica o cefalica).

- Secondo i Centers for Disease Control (CDC) di Atlanta (USA), l'operatore deve lavarsi le mani con il 2% di clorexidina o il 10% di iodio povidone prima del campionamento, oltre a indossare i guanti.

-Palpare e individuare la vena da utilizzare.

-Pulire la zona della puntura in modo rotatorio, effettuando movimenti dal centro verso l'esterno utilizzando clorexidina saponosa o sapone antisettico. Risciacquare con soluzione salina sterile.

Successivamente, applica un antisettico e lascialo agire. Esempio clorexidina gluconato 0,5% per 1 minuto o iodio povidone 10% per 2 minuti. Per quest'ultimo, chiedere prima se il paziente è allergico allo iodio. Se sei allergico, puoi sostituire il 70% di alcol.

Estrazione del campione

- Posizionare il laccio emostatico per esacerbare il flusso sanguigno e far germogliare la vena.

- Non toccare più il sito di puntura con il dito. Se ciò è strettamente necessario, il dito deve essere lavato allo stesso modo dell'area della puntura.

-Inserire l'ago dell'iniettore o il cuoio capelluto nella vena ed estrarre la quantità necessaria di sangue.

-Non mettere cotone o garza sull'ago durante la rimozione se non è sterile.

-Rimuovere il sigillo di sicurezza dalle bottiglie con molta attenzione e senza toccare il tappo. Alcuni autori consigliano di eseguire una disinfezione del tappo prima di inoculare il campione.

- Distribuire la quantità appropriata di sangue nelle fiale. Se il campione viene prelevato con un iniettore, la quantità necessaria viene prima versata nel pallone anaerobico e poi nel pallone aerobico. Se la presa viene eseguita con il cuoio capelluto (farfalla) si versa in modo opposto.

- Mescolare delicatamente il flacone di emocoltura per inversione.

- Cambiare i guanti e ripetere i passaggi precedenti per la seconda raccolta di campioni.

-Se il secondo campione viene prelevato da un sito diverso, può essere eseguito immediatamente, ma se proviene dallo stesso sito, è necessario attendere dai 30 ai 90 minuti tra un campione e l'altro.

- Il campione deve essere portato in laboratorio il prima possibile, se ciò non è possibile deve essere lasciato a temperatura ambiente per un massimo di 18 ore.

Cultura

Una volta in laboratorio, le fiasche vengono incubate a 37 ° C nelle condizioni di ciascuna fiaschetta, cioè rispettivamente in aerobiosi e anaerobiosi.

Con il metodo manuale, la suoneria dovrebbe essere avviata a 24 ore di incubazione e quindi la suoneria ogni giorno. Gli anelli vengono eseguiti come segue: prima si disinfetta il tappo del flacone e si inserisce l'ago di un iniettore sterile. Il liquido viene estratto dal pallone e seminato su agar sangue e agar cioccolato.

Se c'è crescita, viene eseguito un grammo, sottocolture in terreni specifici, test biochimici e antibiogramma.

Nei metodi automatizzati l'apparecchiatura Bact / Alert emette un allarme quando rileva che una fiala è positiva. Allo stesso modo, dovrebbe essere picchiettato su agar sangue e agar cioccolato.

Un altro metodo che sta guadagnando terreno è quello di analizzare il pallone dopo 6 ore di incubazione tramite spettrometria di massa. Questo metodo ha contribuito ad aumentare la sensibilità e la velocità della diagnosi.

risultati

Finché il flacone per emocoltura è negativo, è possibile fornire rapporti intermedi preliminari al medico curante. Il rapporto indica che è negativo nelle ore in cui è stato incubato. Ad esempio, se diventa negativo fino al quarto giorno, verrà riportato come segue:

Risultato preliminare: coltura negativa a 96 ore di incubazione.

Nota: lo studio continua per 240 ore.

Se l'emocoltura è positiva, il medico curante viene immediatamente informato e viene inviato un referto con almeno il grammo della colonia. Esempio:

Risultato preliminare: in coltura positiva a 48 ore di incubazione, si osservano bacilli gram negativi e ossidasi negativa. Identificazione e test di sensibilità sono in corso.

Queste informazioni guidano il medico curante ad avviare una terapia empirica verso il possibile microrganismo, in attesa del risultato finale del laboratorio.

Una volta completato lo studio batteriologico, cioè, il microrganismo è stato identificato e l'antibiogramma è disponibile, il rapporto finale deve essere inviato il prima possibile.

Si deve prestare particolare attenzione se l'organismo bersaglio è Neisseria gonorrhoeae o Neisseria meningitidis, poiché questi batteri sono inibiti in presenza di alte concentrazioni di sodio polianetosolfonato (SPS).

Ecco perché questo composto non deve superare lo 0,025% nei flaconi per emocoltura.

D'altra parte, se il campione di emocoltura viene prima prelevato in provette Vacutainer, queste provette hanno concentrazioni di SPS tossiche per meningococchi e gonococchi, quindi il sangue deve essere trasferito entro 1 ora al sistema di coltura in brodo.

Come capire se un'emocoltura è positiva o contaminata

Un'emocoltura è considerata contaminata quando c'è crescita in una sola fiala di emocoltura dal totale prelevato. E il sospetto di contaminazione aumenta se il microrganismo isolato è un microbiota cutaneo abituale: esempio: Staphylococcus coagulase negativo, Propionibacterium spp, tra gli altri.

Tuttavia, nei pazienti immunocompromessi, nessun microrganismo dovrebbe essere trascurato, ma in questo caso il microrganismo dovrebbe apparire in diversi campioni.

D'altra parte, se la sensibilità agli antibiotici dello stesso microrganismo isolato in due campioni diversi è la stessa, l'infezione è reale.

Un'altra caratteristica è la carica batterica, poiché le emocolture contaminate crescono tardi, mentre le infezioni reali nei pazienti non trattati sono generalmente positive a 14 ore di incubazione quando il microrganismo non è fastidioso.

D'altra parte, nei pazienti trattati con antimicrobici, il microrganismo coinvolto può impiegare tempo per crescere perché il carico è molto basso.

La comparsa di più di un microrganismo può suggerire una contaminazione, ma se lo stesso risultato viene ripetuto in più riprese da siti diversi, allora è reale.

Riferimenti

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