STRISCIO DI SANGUE: CARATTERISTICHE, TIPI, TECNICHE E ISTOLOGIA - BIOLOGIA - 2025

Lo striscio di sangue è uno striscio di sangue periferico che viene utilizzato per analizzare i componenti presenti nella circolazione sanguigna. L'osservazione di uno striscio di sangue fornisce dati ematologici molto utili per la diagnosi e il follow-up di molte patologie.

Lo striscio di sangue permette di quantificare il numero dei diversi tipi di globuli bianchi (formula dei leucociti), oltre che di analizzare la morfologia e la forma di eritrociti, leucociti e piastrine.

Preparazione dello striscio di sangue. Fonte: sangue in un bicchiere da laboratorio. Public DomainPictures.net

In esso si possono rilevare anomalie nel numero di cellule, come: leucocitosi o leucopenie, linfocitosi o linfopenia, neutrofilia o neutropenia, trombocitosi o trombocitopenie ed eosinofilia. Si possono anche osservare anomalie nella dimensione e nella forma delle cellule.

Inoltre, è possibile rilevare vari tipi di anemie, leucemie e infezioni batteriche o parassitarie del sangue.

Per questo, ci sono vari tipi di strisci che vengono eseguiti a seconda dello scopo dello studio. Ci sono macchie sottili e macchie spesse. Queste sbavature differiscono nella tecnica di esecuzione e nello scopo dello studio.

Quelli con gocce sottili sono usati come coadiuvante per completare l'ematologia. Questo fornisce dati sulla formula dei leucociti, oltre all'analisi della forma e morfologia delle tre serie cellulari che compongono il sangue: serie rossa, serie bianca e piastrine. Sebbene servano anche come complemento allo studio dello strato di sangue spesso.

Il film spesso viene utilizzato per la diagnosi di malattie causate da emoparassiti, come malaria o malaria, toxoplasmosi, leishmaniosi, malattia di Chagas, babesiosi e microfilariasi.

Caratteristiche di uno striscio di sangue

Un buon striscio di sangue deve soddisfare determinate caratteristiche. Tra questi possiamo citare:

-Il campione deve soddisfare i requisiti minimi di qualità per essere rappresentativo.

-Il campionamento deve essere ben eseguito.

-Esecuzione tempestiva dello striscio.

-Se eseguito con sangue venoso, utilizzare un anticoagulante che non deformi le cellule e mescolare la provetta prima di effettuare lo striscio.

-Se è fatto con sangue capillare, scartare la prima goccia.

-La diffusione deve essere omogenea. Ciò garantisce che le cellule siano distribuite uniformemente e che le cellule del sangue possano essere ben analizzate per forma e numero.

-I lati dello striscio dovrebbero essere lisci dall'inizio alla fine.

-Lo striscio deve rispettare un margine da 1 a 2 mm ai lati del vetrino.

-Lo strato di striscio dovrebbe diminuire gradualmente di spessore dall'inizio alla fine (spalmare con una goccia sottile con il metodo a scorrimento).

-Deve essere adeguatamente etichettato per evitare confusione con il campione.

-Fissare e colorare adeguatamente per una chiara osservazione degli elementi del sangue.

-Lasciare asciugare molto bene lo striscio prima di montare la preparazione al microscopio. L'applicazione di olio per immersione su uno striscio umido provocherà la formazione di micelle che impediscono la visualizzazione delle cellule.

Tipi di striscio di sangue

Gli strisci di sangue periferico possono essere classificati in striscio sottile e striscio spesso. Quelli a strato sottile vengono utilizzati per lo studio della formula dei leucociti e l'osservazione morfologica delle cellule del sangue. Si possono anche vedere batteri extracellulari come la borrelia e gli emoparassiti intracellulari, come il plasmodio, tra gli altri.

Nel blob fine si può identificare la specie del parassita, quindi, è una tecnica più specifica rispetto al blob spesso, ma il blob spesso è più sensibile, poiché è una tecnica di concentrazione utilizzata per la ricerca esaustiva di emoparassiti extracellulari.

Esistono due tipi di strisci a goccia fine: quelli eseguiti sui vetrini e quelli eseguiti sui vetrini coprioggetto. Gli strisci spessi vengono eseguiti su vetrini.

Tecniche per il prelievo di campioni di sangue

Gli strisci di sangue possono essere effettuati da una puntura capillare o da un campione venoso prelevato con anticoagulante. Se viene eseguito da sangue con anticoagulante, lo striscio può essere preparato fino a 2 ore dopo il prelievo del campione.

Si deve prestare attenzione all'uso di anticoagulanti che non deformano le cellule del sangue. L'opzione migliore è EDTA. Al contrario, dovrebbe essere evitato l'uso di anticoagulanti come il citrato trisodico.

Se il campione viene prelevato mediante puntura capillare, lo striscio deve essere esteso immediatamente, prima che il sangue si coaguli.

La prima goccia deve essere scartata, consentendo alla goccia successiva di fuoriuscire spontaneamente per evitare la diluizione del campione con fluido tissutale. È la tecnica più consigliata per l'osservazione della morfologia cellulare, poiché il sangue non ha additivi.

Per l'osservazione degli emoparassiti, Solari et al.hanno concluso nel loro lavoro di ricerca che entrambe le tecniche (puntura venosa e capillare) sono ugualmente efficienti.

Tipi di prelievo di sangue: A. Puntura capillare. B. Puntura venosa. Fonte: A. Flickr.com B. Pxhere.com

Tecniche per preparare lo striscio di sangue

Lo striscio di sangue può essere eseguito manualmente su vetrini da microscopio o su un vetrino o un vetrino. È possibile anche tramite apparecchiature automatizzate.

-Slides sbavature

È la tecnica preferita dalla maggior parte dei laboratori grazie alla sua facile manipolazione.

Utilizzando una pipetta Pasteur, posizionare una goccia di sangue non molto densa o molto sottile al centro di un'estremità di un vetrino pulito.

Lo striscio viene realizzato con l'aiuto di un altro vetrino con un'estremità a terra. Il vetrino smerigliato è posizionato perpendicolarmente all'estremità opposta rispetto a dove si trova la goccia.

Si inclina con un angolo compreso tra 30 e 45 ° e scivola verso la discesa; al tocco si espande linearmente sul bordo della slitta a terra e con un movimento costante e definito ritorna il foglio; prima di raggiungere la fine lo scivolo viene sollevato.

In questo modo, uno strato omogeneo viene distribuito sulla superficie del vetrino ricevente.

Lo striscio viene lasciato asciugare. Viene quindi fissato e colorato con la macchia preferita. Lasciar asciugare bene prima di guardare al microscopio. Una goccia di olio viene posta sul viso che mostra lo striscio e osservata al microscopio ottico.

Striscio di sangue sul vetrino. Immagine in alto: sbavatura non macchiata. Immagine inferiore: macchia macchiata. Fonte: Coinmac

Parti dello striscio realizzate su vetrini

In questo tipo di striscio, si possono distinguere tre aree definite: la testa, il corpo e la coda. La testa corrisponde all'area in cui inizia lo striscio, è l'area più spessa e non è bene osservare.

Il corpo è la parte centrale o intermedia dello striscio, è l'area migliore da osservare al microscopio, perché lì le cellule sono distribuite uniformemente e la loro morfologia è preservata.

La coda corrisponde alla parte finale dello striscio; qui la distribuzione non è più uniforme e la morfologia degli eritrociti tende a perdersi.

Controllo di qualità nella tecnica delle diapositive

In questa tecnica gioca un ruolo fondamentale:

-Pulizia e sgrassaggio del vetrino: garantisce il buon scorrimento del campione.

-La dimensione della goccia: con gocce molto grandi si otterrà uno striscio più spesso e più lungo, con una goccia molto piccola la diffusione sarà più corta ed estremamente fine.

-La velocità applicata nell'estensione: minore è la velocità dello striscio più sottile, maggiore sarà la velocità più denso.

-L'angolo di esecuzione: più piccolo è l'angolo più fine è lo striscio, maggiore è l'angolo più spesso.

-Passare sul vetrino

Non è ampiamente utilizzato perché la manipolazione di vetrini fragili è ingombrante, tuttavia offre grandi vantaggi, poiché si ottiene una migliore distribuzione delle cellule in tutto lo striscio.

Una goccia non molto spessa e non molto sottile è posta al centro di un vetrino. Immediatamente un altro vetrino viene posizionato sopra di questo in modo tale che le punte di entrambi i vetrini sporgano, formando una stella.

La goccia si diffonderà spontaneamente sulla superficie di entrambi i vetrini. Alla fine dell'estensione, ogni diapositiva viene fatta scorrere rapidamente sul lato opposto (uno a destra e l'altro a sinistra).

La tecnica prevede due strisci invece di uno.

Si mettono ad asciugare con la parte spalmata rivolta verso l'alto. Una volta asciutto, viene fissato e colorato con la tecnica preferita. Lascia asciugare. Una goccia di olio da immersione viene posta su un vetrino, lo striscio viene posizionato con il lato dello striscio rivolto verso il basso e visualizzato al microscopio.

Controllo di qualità nella tecnica del coprioggetto

Per ottenere un buon striscio per questa tecnica è importante:

-Pulire i coprioggetti (aiuta il campione a scorrere senza problemi).

-La dimensione della goccia (influenza lo spessore dello striscio).

-La velocità con cui si separano i vetrini coprioggetto (influenza l'omogeneità della diffusione).

-Con attrezzatura automatizzata

Possono essere eseguiti tramite uno qualsiasi di questi team: Spinner e Autoslide.

Lo Spinner consiste nel posizionare un vetrino con una goccia di sangue su una speciale piastra per centrifuga. Il campione viene centrifugato ad alte velocità; in questo modo si forma uno striscio omogeneo e fine del campione. Ha lo svantaggio della possibilità di emolisi del campione.

L'Autoslide è uno strumento che esegue meccanicamente i movimenti per l'esecuzione dello striscio su vetrini. Puoi anche aggiustare e macchiare lo striscio. Può anche essere adattato ad alcuni contatori ematologici automatici.

Tecnica a striscio spesso

Per la ricerca di emoparassiti, si consigliano due strisci: uno con una goccia sottile e uno con una goccia spessa.

Eseguire una puntura capillare, pulire la prima goccia. Posizionare una goccia sottile su un vetrino e spalmare come spiegato in precedenza. Per il tallone spesso, posiziona un tallone grande su un altro vetrino e distribuiscilo in un quadrato di 1,55 mm. Lascia asciugare i due strisci.

Macchie di macchie

Le macchie di Giemsa o Wright, tra le altre, possono essere utilizzate per gocce fini. La colorazione Giemsa o May-Grunwald Giemsa è consigliata per strisci spessi.

Macchia di Giemsa

Lo striscio viene fissato per 3 minuti con metanolo, scolato e lasciato asciugare nuovamente. Lo striscio viene quindi coperto con il colorante Giemsa per 10-15 minuti. Si lava con acqua distillata e si lascia asciugare. Per osservare al microscopio viene posta una goccia di olio da immersione.

La macchia di Wright

Lo striscio viene coperto con la macchia di Wright per 5 minuti. Eliminare e posizionare la soluzione tampone a pH 6,8 per 6 minuti. Soffiare la preparazione per omogeneizzare. Lavare con acqua distillata e lasciare asciugare. Osserva al microscopio.

Tipi di sbavature difettose

Si verifica negli allievi nella tecnica della caduta fine con diapositive.

Macchie con aree di diverso spessore (sottili e spesse intervallate)

È perché il movimento eseguito non è stato costante durante lo spread, effettuando fermate e ripartenze.

Striscio molto corto

Hanno 2 cause: una è perché lo scivolo a terra è stato sollevato prima di raggiungere l'altra estremità dello scivolo. In questo caso è estremamente spesso e corto.

D'altra parte, se lo striscio è corto ma sottile, è perché la dimensione della goccia era molto piccola.

Spalma con un'area rastrellata verso la fine dello striscio

Ha diverse cause: una è che il bordo rettificato è difettoso, che la pressione esercitata sul vetrino ricevente è aumentata al momento della diffusione o che il bordo rettificato del vetrino è usurato.

Spalmare con formazione di vacuoli o aree chiare arrotondate o ellittiche

Sono dovuti all'uso di sbavature unte (scarsamente lavate e sgrassate).

Strisci molto spessi o molto sottili

Gocce troppo grandi produrranno sbavature molto spesse dall'inizio alla fine e gocce molto piccole produrranno sbavature molto fini.

Istologia

Le cellule del sangue possono essere viste in uno striscio di sangue. Tra loro ci sono:

-Eritrociti o globuli rossi

Sangue umano, eritrociti o globuli rossi e due globuli bianchi. Tratto e modificato da: Viascos La tua osservazione è della massima importanza. A questo livello possono essere rilevate anemie, talassemia, malattie del midollo osseo, ecc.

Il numero di eritrociti o globuli rossi è di circa 5 x 10 ⁶ mm3 negli uomini e 4,5 x 10 ⁶ nelle donne. I globuli rossi hanno la forma di dischi biconcavi, con un pallore fisiologico centrale. Possono essere visti separatamente (normale) o formare pile di rouleaux (anormali).

Gli strisci mostrano anche poichilocitosi (globuli rossi di varie forme), anisocitosi (globuli rossi di varie dimensioni), anisopoichilocitosi (varie forme e dimensioni), anisocromia (diversi colori), eritroblasti (globuli rossi immaturi), microcitosi (globuli rossi più piccoli) ) e macrociti (eritrociti più grandi).

Quando presentano carenza nella quantità di emoglobina e aumenta il pallore centrale, si dice che ci sia ipocromia. Quando si osserva una serie rossa normale, sarà riportata come normocitica e normocromica.

-Cellule del sangue bianche o leucociti

globuli bianchi

La quantità normale varia da 5.000 a 10.000 mm ³ . Sono alterati nei processi infettivi, nelle allergie e nella leucemia. Diversi tipi possono essere distinti nello striscio di sangue, che sono spiegati di seguito.

Neutrofili segmentati

Rappresentano il 55-65% dei leucociti totali. Misurano tra 10-15 μm. Hanno un nucleo segmentato o lobato che adotta morfologie diverse, per questo è chiamato polimorfonucleare.

Hanno abbondanti granuli neutrofili nel loro citoplasma e alcuni azurofili. Aumentano le infezioni batteriche (neutrofilia), diminuiscono le infezioni virali (neutropenia).

Si possono osservare anomalie morfologiche come pleocariocitosi (nuclei iper-segmentati), archi (cellule immature) o macro-politiche (ovali e grandi).

Altre alterazioni:

-Granulazioni tossiche

- Neutrofili pseudo Pelger (il nucleo non presenta lobulazioni o sono bilobati).

-Corpi di Döhle: inclusioni citoplasmatiche blu scuro.

-Aumento della basofilia citoplasmatica.

-Vacuoli intracitoplasmatici.

-Picnosi cellulare (perdita di ponti internucleari).

Eosinofili segmentati

Rappresentano 1-3% dei globuli bianchi totali. Misurano 9-10 μm. Sono caratterizzati dalla presenza di abbondanti granuli citoplasmatici acidofili e pochi azurofili. Il suo nucleo ha due lobulazioni. Il loro numero aumenta nelle allergie e nelle malattie di origine parassitaria.

Basofili segmentati

Sono estremamente rari e rappresentano lo 0-1% dei leucociti. Misurano 10-12μm. Il nucleo è solitamente irregolare nei bordi e può essere bilobato, ma non si vede a causa del gran numero di granulazioni basofile grossolane nel suo citoplasma. Molto raramente si può vedere la basofilia.

linfociti

Sono piccole cellule con citoplasma basofilo, con nucleo, ben definito, rotondo, con cromatina condensata. Il nucleo comprende quasi l'intera cellula. Rappresentano il 26-40% dei leucociti del sangue. Aumentano le infezioni virali (linfocitosi). Si possono vedere linfociti reattivi.

I monociti

Cellule più grandi dei linfociti, con citoplasma più grande e nuclei di cromatina ovali più sciolti. Misurano 9-12μm. Il citoplasma è abbondante e di solito appare blu grigiastro chiaro con tecniche di colorazione standard. Tra le alterazioni si possono osservare monociti vacuolati e monocitosi.

-Platelets

Misurano tra 1,5-3 μm. La sua forma è rotonda o ovale. Il valore normale varia da 150.000 a 350.000 piastrine / mm3. Possono diminuire in alcune infezioni virali. Non hanno un nucleo e sono di colore viola. In questa serie possono essere osservate anomalie, come macro o micro piastrine, trombocitosi o trombocitopenia e frammenti piastrinici.

Elementi patologici

Parassiti del sangue

Negli strisci di sangue possono essere presenti emoparassiti, come l'agente eziologico della malaria o della malaria (parassiti del genere Plasmodium). Per questo motivo, è importante che lo striscio venga analizzato manualmente, poiché l'apparecchiatura automatizzata non rileva questo risultato.

batteri

In patologie come la febbre recidivante o la malattia di Lyme, è possibile osservare il suo agente eziologico. In questo caso, corrisponde a Borrelia recurrenti spirochete e Borrelia burgdorferi nello striscio di sangue.

Cellule immature

Casi gravi si osservano, tra gli altri, nelle leucemie, nelle reazioni leucemoidi e nelle reazioni leucoeritroblastiche. Nelle infezioni batteriche possono esserci lievi deviazioni a sinistra (presenza di truffatori). Gli eritroblasti possono anche essere visti in alcune anemie.

Riferimenti

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