- Processi
- Procedura tecnica
- A cosa serve la microscopia a striscio?
- Sbavare negativo
- Striscio positivo
- Riferimenti
Lo striscio è uno strumento diagnostico per la tubercolosi polmonare attiva. È una tecnica di laboratorio che consente il rilevamento e la misurazione di bacilli acido-resistenti come il Mycobacterium tuberculosis. È il metodo più utilizzato al mondo per diagnosticare la tubercolosi polmonare attiva nella comunità e per valutare i benefici del trattamento.
La tubercolosi polmonare è una malattia infettiva causata dal Mycobacterium tuberculosis che infetta i polmoni ma può colpire altri organi e sistemi. In tutto il mondo, più di 6 milioni di persone soffrono di tubercolosi polmonare (TB).
Cellule di M. tuberculosis in uno striscio di espettorato (Fonte: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) tramite Wikimedia Commons)
Il Mycobacterium tuberculosis e altre specie di Mycobacterium non tubercolari possiedono un rivestimento lipidico sulla parete cellulare ricco di acido micolico, resistente allo scolorimento dell'alcool acido dopo la colorazione con coloranti basici.
Pertanto, vengono utilizzati metodi di colorazione speciali come il metodo Ziehl-Neelsen. Questi metodi semplici ed economici consentono al muro di trattenere la macchia quando il campione viene risciacquato con una soluzione acida e la parete del Mycobacterium diventa rossa a differenza di altri batteri che si colorano di blu.
Per eseguire una microscopia a striscio, è necessario un campione di espettorato, preferibilmente prelevato al mattino quando ti alzi. Possono essere utilizzati anche campioni di tessuto o campioni di fluido corporeo.
Processi
I campioni da processare per la microscopia a striscio sono campioni di espettorato, campioni di tessuto o campioni di fluidi corporei. I campioni di tessuto possono essere estratti mediante broncoscopia o biopsie di linfonodi o altri tessuti.
Poiché la tubercolosi può colpire qualsiasi organo o sistema, i campioni possono essere molto vari, inclusi: campioni di urina, liquido cerebrospinale, liquido pleurico, liquido ascitico, sangue, pus da cavità aperte, biopsie , eccetera.
Anche i campioni di lesioni extrapolmonari devono essere processati per la coltura. I campioni di espettorato vengono raccolti nelle ore mattutine dopo la lievitazione.
È possibile raccogliere più campioni in fila o in giorni consecutivi. I campioni devono essere etichettati in bottiglie chiuse a bocca larga. Dovrebbero avere i dati del paziente, il tipo di campione e la data della raccolta del campione.
Procedura tecnica
- Una volta ottenuto il campione, può essere centrifugato per concentrarsi o utilizzato direttamente. La procedura iniziale consiste nel posizionare alcune gocce del campione e distribuirle su un vetrino.
- Il campione viene coperto con fuchsin filtrata (soluzione colorante).
- Successivamente si scalda fino ad ottenere circa tre emissioni di vapore biancastro.
- Attendere cinque minuti affinché il campione si raffreddi e lavarlo con acqua.
- Viene coperto con una soluzione sbiancante (alcool acido) per un periodo di 2 minuti.
- Viene nuovamente lavato con acqua.
- Il campione viene coperto con blu di metilene e lasciato riposare per un minuto.
- Si lava via con acqua.
- Lasciar asciugare all'aria e procedere all'osservazione al microscopio.
Fotografia da un microscopio (Immagine di Konstantin Kolosov su www.pixabay.com)
Questa procedura è rapida, semplice, poco costosa e consente alle cellule del Mycobacterium tuberculosis di colorare di rosso. Questa tecnica è chiamata tecnica di colorazione Ziehl-Neelsen.
L'osservazione microscopica consiste nell'identificare la presenza di bacilli acido-resistenti e nella loro quantificazione per campo.
Le cellule del Mycobacterium tuberculosis appaiono come bastoncelli rossi, granulari e ricurvi su sfondo blu. Possono essere isolati, accoppiati o raggruppati. L'osservazione deve essere eseguita per campo e devono essere esaminati almeno 100 campi per ogni striscio.
Il risultato è considerato positivo quando ci sono, in ogni campo, più di 10 cellule di M. tuberculosis. Ciò corrisponde a 5.000-100.000 bacilli per ogni millilitro di campione.
In questi casi, è considerato positivo per Mycobacterium tuberculosis, poiché Mycobacterium non tubercolare o altri batteri resistenti agli acidi hanno forme diverse e generalmente la quantità osservata per campo è inferiore a 10.
La persona che esamina il campione deve avere esperienza o competenza nella rilevazione e nel riconoscimento di questi microrganismi, poiché nei risultati possono esistere falsi negativi o falsi positivi.
Esistono altre tecniche fluoroscopiche che sono più sensibili, ma molto più costose. Una di queste tecniche utilizza la colorazione Auramina-O per ottenere una fluorescenza verde o la colorazione Auramina O / Rodamina B per osservare la fluorescenza giallo / arancione.
I casi positivi vengono generalmente eseguiti per coltura e antibiogramma per confermare la diagnosi e la selezione appropriata del trattamento.
A cosa serve la microscopia a striscio?
La tubercolosi è una malattia infettiva che colpisce il polmone e altri organi e sistemi di organi del corpo. È una malattia contagiosa che produce gravi lesioni alle vie respiratorie che, se non trattate adeguatamente, possono provocare la morte del paziente.
La tubercolosi si trasmette quasi esclusivamente attraverso goccioline sospese nell'aria dall'espettorazione di un paziente infetto da tubercolosi polmonare. Queste piccole goccioline possono rimanere nell'aria e avere la capacità di infettare la persona che le inala.
M. tuberculosis cells (Fonte: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) tramite Wikimedia Commons)
L'infezione richiede un tempo di contatto prolungato con un paziente infetto che sputa continuamente bacilli in un ambiente scarsamente ventilato. Le persone con immunodeficienze hanno maggiori probabilità di contrarre l'infezione.
I pazienti HIV positivi hanno maggiori probabilità rispetto al resto della popolazione di sviluppare gravi infezioni respiratorie, inclusa la tubercolosi polmonare. Da qui l'importanza della microscopia a striscio come metodo diagnostico rapido ed economico per la tubercolosi.
La microscopia a striscio consente di effettuare una diagnosi batteriologica della tubercolosi, tuttavia, un risultato positivo deve essere confermato con altri studi.
Gli studi che confermano la diagnosi di tubercolosi comprendono esami radiologici che mostrano immagini caratteristiche nei lobi superiori del polmone, test alla tubercolina positivi e colture di campioni positive.
Sbavare negativo
Una microscopia a striscio negativo non esclude necessariamente la diagnosi di tubercolosi, poiché soprattutto quando il campione è espettorato, l'eliminazione dei bacilli non è costante. Pertanto, in questi casi, quando si sospetta la diagnosi, sono necessari campioni seriali.
Striscio positivo
Un microscopio a striscio positivo è indicativo di tubercolosi e deve essere confermato con altri studi complementari. Ogni volta che il risultato è positivo, è necessario eseguire una coltura e un antibiogramma.
Una volta stabilito il trattamento, una diminuzione sostenuta della scala di positività della microscopia a striscio fino ad ottenere risultati negativi, consente di controllare i benefici del trattamento.
Riferimenti
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